| 查看: 762 | 回复: 5 | |||
[交流]
【求助/交流】RT-PCR 已有4人参与
|
| 大家做RT-PCR时，RNA加多少？CDNA加多少呀？最近做RT-PCR，结果老是不很理想，P出来的条带不亮，不知道是哪出了问题，请高手们指点一下 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有111人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 急求RT-PCR电泳图分析
已经有22人回复
- 关于RT-PCR的众多细节
已经有18人回复
- 实时荧光RT-PCR实验的相关问题
已经有8人回复
- 求助！关于RT-PCR的问题！
已经有20人回复
- 请教RTPCR。。
已经有4人回复
- RT-PCR相关问题
已经有5人回复
- ＲＴ－ＰＣＲ问题求助
已经有18人回复
- 【求助/交流】做过RT-PCR的请进
已经有12人回复
- 【求助/交流】RT-PCR不成功
已经有25人回复
- RT-PCR后的cDNA呢？
已经有17人回复
zhwenxing
木虫 (著名写手)
尛森蟲
- 应助: 11 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2189.8
- 散金: 50
- 红花: 2
- 帖子: 1324
- 在线: 93.3小时
- 虫号: 596551
- 注册: 2008-09-09
- 专业: 疫苗学
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):很热心 很细致 2010-05-19 18:44:18
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):很热心 很细致 2010-05-19 18:44:18
|
烦请楼主将问题说得清楚一些，具体的实验步骤如何做的，大家才能各抒己见哈。O(∩_∩)O哈哈~ 1、您是一步法还是两步法？一步法的话，考虑RNA的纯度问题，还有反应体系的精确性。两步法的话，先反转录，根据不同的逆转录酶的要求去考量RNA的用量。 2、如果您用的是总RNA的话，比如promega的m-mlv，那么，25ul的反应体系，需要加入量为2-3ug，酶的用量为200U，如果用AMV的话，需要25U就足够了，但是其内切酶活性等均会升高。自己根据酶的性质来确定。 3、如果用mRNA作为反转录的模板会好很多，不知您是否需要纯化mRNA。 4、扩增如Actin之类的基因检测反转录的结果并不能准确的定量反转录的效率。 …… |
2楼2010-05-19 17:46:40
3楼2010-05-19 17:53:30
4楼2010-05-21 09:06:47
liyong1981 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
5楼2010-05-21 09:42:21
6楼2010-05-21 14:43:13
