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zj0726

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RT-PCR 已有4人参与

大家做RT-PCR时,RNA加多少?CDNA加多少呀?最近做RT-PCR,结果老是不很理想,P出来的条带不亮,不知道是哪出了问题,请高手们指点一下
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zj0726

铜虫 (小有名气)

1949stone:表述明白了 虫友就可以更好的提供帮助了 2010-05-19 18:44:55
我是做半定量的RT-PCR。用两步法做的,先用总RNA反转录成CDNA ,用的是TAKARA的RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0,按照说明书做的10ul体系,然后再用1ul的CDNA做25ul体系的PCR反应(35个循环)。现在是内参也不是很亮
3楼2010-05-19 17:53:30
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zj0726

铜虫 (小有名气)

内参引物是用师姐的,我看她P的还不错呢
6楼2010-05-21 14:43:13
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