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raulwen2002

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】微生物纤维素酶活测定 已有7人参与

请教各位大侠一个问题,本人目前在做纤维素降解菌对木薯渣的降解效果。使用的菌是从菌种保藏中心购买的高效纤维素降解菌,采用的方法是DNS显色,用分光光度计测定CMC酶活和滤纸酶活时,失活酶的测定值却高于酶酶解反应后的值,请问谁知道可能是什么原因啊?谢谢啦!
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段家一凡

木虫 (正式写手)

★ ★
plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-16 01:45:04
raulwen2002(金币+2): 2010-05-16 20:53:55
引用回帖:
Originally posted by zhangjiewtt at 2010-05-14 21:25:53:
纤维素酶是一种多组分酶,包括C1酶、CX酶和β-葡萄糖苷酶三种主要组分。其中C1酶的作用是将天然纤维素水解成无定形纤维素,CX酶的作用是将无定形纤维素继续水解成纤维寡糖,β-葡萄糖苷酶的作用是将纤维寡糖水解成 ...

C1,CX已是比较古代的说法了。
测纤维素酶活性,偶尔会出现对照的吸光值比酶反应的还高的情况,一般是差不多。你可以延长反应时间或增加酶量或同时增加,应该能看到酶活,如果还没有,只能说明你购买的菌不好,或者是你的发酵条件不适于纤维素酶的产生。你可以再摸索产酶的条件。
8楼2010-05-14 23:45:22
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫


1949stone(金币+1):谢谢 2010-05-14 13:25:43
你的产物里面含有还原性糖,失活酶的测定值应该是这个原因。
仕不可不弘毅,任重而道远
2楼2010-05-13 15:08:04
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zhjp326

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
1949stone(金币+2):信息交流经验 2010-05-14 13:25:54
测还原糖的方法很多的,找一个灵敏的试试,比如铁氰化钾法,或者其他方法,可能会有用,DNS法灵敏度不够高,不过它操作简单方便,所以大家都用。
3楼2010-05-13 16:50:00
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raulwen2002

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2010-05-13 15:08:04:
你的产物里面含有还原性糖,失活酶的测定值应该是这个原因。

但没有失活的酶液里也有还原性糖啊,因为酶液都是一样的,只是存在失活和不失活的区别,怎么会出现失活酶的吸光度要高于没有失活酶的吸光度呢
4楼2010-05-14 09:47:07
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