24小时热门版块排行榜    

查看: 2226  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR扩增怎么就没有条带! 已有17人参与

我想请问一下,我最近做PCR反应的时候怎么就没有目的基因片段产物???
是不是以下条件出问题了?

1)退火温度
2)引物浓度
3)模板浓度
4)dNTP浓度
5)Taq PlusI 聚合酶浓度
6)10X PCR buffer.

dNTP、Taq Plus聚合酶、10X PCR buffer 都是新的,剩下第一和第二的因素,
我想请问的是我一直P不出条带出来,是不是引物或者模板的问题??
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxb2008

木虫 (著名写手)

同样的问题


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我在做反转录,也是什么条带也没有。我昨晚总结了一下。可能主要原因是自己加的量不对,应仔细检查加的量和反应条件,希望多多交流。871193014。
5楼2010-05-08 15:14:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

keeperw

捐助贵宾 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很有可能是引物的原因,最主要两条:3’端特异性要有保证;退火温度要一致
2楼2010-05-08 14:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

todouhy

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
再次检查一下自己的引物是否设计合理,各个组分的浓度!
3楼2010-05-08 14:56:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
p不出来,一般就是引物问题,引物之前如果没有做过,那一般就是引物问题。但是模板也不容忽视,模板质量和浓度也要注意
4楼2010-05-08 15:03:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 5/250 2026-02-08 08:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我,科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[教师之家] 有院领导为了换新车,用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生,欢迎大家推荐交流(博导是本人) +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生|MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
请填处理意见