应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】AFLP选择性扩增问题
41/1返回列表
查看: 1003  |  回复: 7
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

niemingyu

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】AFLP选择性扩增问题 已有5人参与

用北京鼎国的AFLP试剂盒做，在选择性扩增过程中，说明书上是配制25微升体系，但鉴于我实际情况，打算配制50微升体系，在下的问题是在反应体系倍增的情况下，以前东东都相应增加多少啊？？
原25体系：
预扩稀释样品：2
10倍PCR buffer 2.5
dNTPs             0.5
两种引物各1微升
Taq 酶      0.5
H2O          17.5
多谢了~
这里祝各位青年节快乐~~！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-04 09:57:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
1949stone(金币+1):是个办法 不过好像酶的用量 模板等不用增加一倍吧 2010-05-04 13:53:42
1949stone(金币+1):是个办法 不过好像酶的用量 模板等不用增加一倍吧 2010-05-04 13:53:42
都增加一倍不就行了，这还用问啊
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-05-04 13:35:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
lstt09nk(金币+1):欢迎回帖交流~~ 2010-05-04 20:55:38
niemingyu(金币+1): 2010-05-07 20:45:44
如果25ul现在没问题，增加一倍是最保险的，酶没有改变的必要，如果为了节约可以摸索一下，但是这跟体系多大没有关系。模板多少一般有个范围，所以改变可能也不影响
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-05-04 15:30:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zhwenxing at 2010-05-05 02:00:04:
1、酶加倍并不合理。反应曲线并不是直线线性关系，离子强度是个影响因素。

...

反应曲线是并不是直线线性关系，但是加倍的目的是酶的浓度没有变化，那么对应在曲线点上的位置也没有变化，跟是不是直线线性就没有关系，我不太明白你说的是什么意思？
赞一下 回复此楼
8楼2010-05-07 20:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 niemingyu 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭