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proteinwang铜虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度事宜请教！已有7人参与
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前段时间做考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度时，测定OD595nm处的值比较低，现向大家请教一下在此试验过程中的注意事项。 1、考马斯亮兰G―250染料试剂的配制过程中，考马斯亮兰G―250必须先溶于95%的乙醇后，再添加85%的磷酸，最后定容吗？是不是可以把考马斯亮兰G―250，95%的乙醇和85%的磷酸一块放到容器中，然后溶解后定容呢？ 2、用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别 加入：0、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml，然后用无离子水补充到0.1ml。最后各试管中分别加入5.0ml考马斯亮兰 G―250试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合，5min后测定其OD595，测得值比较低，且基本没有规律性，不知道是什么原因？ 请成功做过相关实验的高手给予解答！ |
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8楼2014-01-03 10:52:14