24小时热门版块排行榜    

查看: 3269  |  回复: 10

zzw1221

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】热激法和电转化法 已有7人参与

做一个100多kb 的克隆测序,利用transposon 插入的方法,插入序列不同的位点,准备测序。用热激法转化做了两次培养不出来,对于这么长的测序是不是电转化法好点,欢迎有经验的同仁进来讨论,谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyydyjsgxb

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zzw1221 at 2010-04-29 16:54:46:
做一个100多kb 的克隆测序,利用transposon 插入的方法,插入序列不同的位点,准备测序。用热激法转化做了两次培养不出来,对于这么长的测序是不是电转化法好点,欢迎有经验的同仁进来讨论,谢谢

序列大了吧
Life is a promise, fulfill it.
2楼2010-04-30 00:50:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是100kb还是100bp啊,好大的片段啊
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
3楼2010-04-30 09:37:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marc0907

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
片段好大啊!
4楼2010-04-30 09:50:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
俺最多转的有十几K,哥们,你的这么大啊,大肠杆菌会撑死的~
5楼2010-04-30 10:02:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)

呵呵,谢谢,我的是的100多kb ,不至于撑死吧,
6楼2010-04-30 10:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那还是电转吧 ,
7楼2010-04-30 10:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


你能介绍下你的怎么做的么》?transposon 什么意思,学习学习,谢谢
8楼2010-04-30 10:42:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣如止水

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
好像在一篇文献中看到过,大片段的用cosmid转化
9楼2010-04-30 11:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-30 10:42:25:
你能介绍下你的怎么做的么》?transposon 什么意思,学习学习,谢谢

其实对这种大的一家族的基因包含各个位点分类的,未知序列因为直接测序没有引物,而且测的长度有限,所以才有插入转化子,在序列上可以插入不同的位点,根据然后根据插入转化子的引物。加上相应的载体固定引物进行测序,这样不同位点的插入得到不同的克隆,进行测序,然后拼接和剪切,对有GAP的地方设计引物连接再测序,你挑去的克隆越多样本越大测的越详细,拼接越简单。原理是这样的,是可以代替亚克隆的一种测序手段,相对高效吧,呵呵,大家交流交流不错
10楼2010-05-01 02:39:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员NXfnjV 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +6 一定有学上- 2026-03-14 7/350 2026-03-17 10:14 by Sammy2
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 4/200 2026-03-16 23:52 by zbzihdhd
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗? 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 材料工程,326分,求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
信息提示
请填处理意见