| 查看: 10358 | 回复: 10 | |||
[交流]
【求助/交流】转化时42度热激时间？ 已有7人参与
|
|
绝大多数都是42度90秒？ 问题一：为啥是42度？为啥是90秒？ 问题二：有些说明说说45秒，比如pMD18Simple载体 以前我都是90秒，这次90秒不长菌，和热激时间有关吗？ 请高人指点。 非常感谢！！! |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有79人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 由于中途有点事情，转化感受态细胞在哪一步可以停一停啊？
已经有7人回复
- 曾经热门的《鬼吹灯》全集来啦【转载】
已经有396人回复
- 热塑性酚醛树脂在不加固化剂的条件下的高温变化情况？
已经有15人回复
- 求助关于转化的问题？
已经有22人回复
- 玻璃态转化温度Tg/热变形温度HDT是热固性材料的最高使用温度么？
已经有33人回复
- 为什么连接这么难呢？
已经有54人回复
- 【求助】热导率随温度的变化
已经有9人回复
- 求热激转化原理！！！
已经有11人回复
- 【求助/交流】热激法和电转化法
已经有10人回复
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
2楼2010-07-18 15:34:26
3楼2010-07-18 15:47:39
4楼2010-07-18 15:50:00
5楼2010-07-18 15:50:22
seahow
木虫 (著名写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1691.1
- 红花: 1
- 帖子: 1778
- 在线: 65.2小时
- 虫号: 78970
- 注册: 2005-07-07
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
6楼2010-07-18 17:02:04
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):酱紫啊~ 2010-07-18 20:45:26
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):酱紫啊~ 2010-07-18 20:45:26
|
不能说完全没有关系~~ 首先氯化钙法制备的感受态，确实，DNA首先附在细胞壁上，然后经过温度反应使得DNA能够进入。但是细菌是存在核酸酶系统的，这样保证在天然的转化过程中不会吸错DNA。异源的DNA会被内源性的核酸酶给搞掉，包括各种各样的外切酶和内切酶。所以有人是猜测必须先在热情况下使得内源性的蛋白功能丧失然后才能顺利转化。当然，如果拿来煮，酶活性自然挂掉，但是菌也会死，蛋白都变形了。那么就需要一种温和的机制，既能使酶活受到剧烈影响，又能在复温后恢复。这时候就需要HSP家族的帮忙来使得热激之后的重折叠得以实现。 当然一切只是猜测，目前关于大肠杆菌人工转化的原理还不清楚。我个人是反对纯物理理论的。因为有的感受态是不需要热激都能转化的……37℃也能自然摄取，不知道是突变了什么东西，没去查文献。 [ Last edited by 三磷酸腺苷 on 2010-7-18 at 18:41 ] |
7楼2010-07-18 18:38:57
cnlics
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 3014.2
- 红花: 4
- 帖子: 270
- 在线: 422.4小时
- 虫号: 795158
- 注册: 2009-06-16
- 性别: GG
- 专业: 当代宗教
8楼2010-07-18 19:20:01
9楼2010-07-18 22:27:31
10楼2010-07-18 23:37:04
