24小时热门版块排行榜    

查看: 3574  |  回复: 10

zzw1221

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】热激法和电转化法 已有7人参与

做一个100多kb 的克隆测序,利用transposon 插入的方法,插入序列不同的位点,准备测序。用热激法转化做了两次培养不出来,对于这么长的测序是不是电转化法好点,欢迎有经验的同仁进来讨论,谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyydyjsgxb

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zzw1221 at 2010-04-29 16:54:46:
做一个100多kb 的克隆测序,利用transposon 插入的方法,插入序列不同的位点,准备测序。用热激法转化做了两次培养不出来,对于这么长的测序是不是电转化法好点,欢迎有经验的同仁进来讨论,谢谢

序列大了吧
Life is a promise, fulfill it.
2楼2010-04-30 00:50:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是100kb还是100bp啊,好大的片段啊
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
3楼2010-04-30 09:37:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marc0907

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
片段好大啊!
4楼2010-04-30 09:50:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
俺最多转的有十几K,哥们,你的这么大啊,大肠杆菌会撑死的~
5楼2010-04-30 10:02:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)

呵呵,谢谢,我的是的100多kb ,不至于撑死吧,
6楼2010-04-30 10:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那还是电转吧 ,
7楼2010-04-30 10:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


你能介绍下你的怎么做的么》?transposon 什么意思,学习学习,谢谢
8楼2010-04-30 10:42:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欣如止水

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
好像在一篇文献中看到过,大片段的用cosmid转化
9楼2010-04-30 11:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-30 10:42:25:
你能介绍下你的怎么做的么》?transposon 什么意思,学习学习,谢谢

其实对这种大的一家族的基因包含各个位点分类的,未知序列因为直接测序没有引物,而且测的长度有限,所以才有插入转化子,在序列上可以插入不同的位点,根据然后根据插入转化子的引物。加上相应的载体固定引物进行测序,这样不同位点的插入得到不同的克隆,进行测序,然后拼接和剪切,对有GAP的地方设计引物连接再测序,你挑去的克隆越多样本越大测的越详细,拼接越简单。原理是这样的,是可以代替亚克隆的一种测序手段,相对高效吧,呵呵,大家交流交流不错
10楼2010-05-01 02:39:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员NXfnjV 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +7 羊腰板 2026-08-21 7/350 2026-08-21 21:28 by iwuli
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
请填处理意见