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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于RNA提取的
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我和我自己

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于RNA提取的已有12人参与

提的RNA电泳检测，A260/A280基本都子在2.0左右，但是A260/A230的比值十分低值，都在0.5左右……请教，怎么才能改善
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1楼2010-04-27 17:13:56
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1): 2010-04-27 22:47
你的样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。
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2楼2010-04-27 17:32:27
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我和我自己

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2010-05-17 19:45:12:
我觉得没必要太过分的要求

可是RNA质量不好，会不会影响mRNA的提取呢？影响大么？请有经验的人赐教
RNA哪方面影响mRNA提取比较大
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17楼2010-06-08 22:33:00
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普通回帖

legend0463

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
260/230代表样品的纯净度的，你的样品杂质太多了，纯化一下吧，祝你顺利
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3楼2010-04-27 17:34:11
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我和我自己

铁虫 (小有名气)
请问用什么方法纯化呢？
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4楼2010-04-27 17:41:59
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jieli.peng

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-30 15:56
一般这个值过低是由于样品中的污染物，如碳水化合物、多肽，Tris缓冲液等，所以尽量减少这些的残留，还有就是乙醇洗涤后要尽可能除尽乙醇，减少盐离子。
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5楼2010-04-30 14:10:46
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1): 2010-04-30 16:37
lstt09nk:合理~~ 2010-06-09 15:59:31
看你后续用RNA做什么实验的，一般的RT，其实不需要质量很高，只要你觉得没有分解，就可以继续往下做
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6楼2010-04-30 16:36:26
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我和我自己

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-30 16:36:26:
看你后续用RNA做什么实验的，一般的RT，其实不需要质量很高，只要你觉得没有分解，就可以继续往下做

我是用来做SSH的……不知道这样的情况可不可以？
要是不可以……在哪些步骤要注意什么？或者有什么方法纯化RNA呢？
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7楼2010-05-05 13:27:43
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-05 15:38:11
SSH？这个方法很古老的了～

既然是做差异，那么最好要质量好的RNA，你后续还要做芯片吧，我估计的没错的话，那就尽量的把RNA质量提高上去～
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8楼2010-05-05 13:37:24
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我和我自己

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-05-05 13:37:24:
SSH？这个方法很古老的了～

既然是做差异，那么最好要质量好的RNA，你后续还要做芯片吧，我估计的没错的话，那就尽量的把RNA质量提高上去～

确实比较古老……不过，只是硕士，先测序分析，能往后最好
可是怎么才能把RNA的质量搞上去……哎
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9楼2010-05-05 15:00:10
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):很热心~~ 2010-06-09 16:01:34
据说，，，可以用kit提，我以前是用的英杰的TRAZOL提的，效果也还很好，我就没测什么比值，一看三条带，很锐利，OK。就往下做了，做的是RACE，也还是不错的
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10楼2010-05-05 15:11:55
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