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我和我自己

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于RNA提取的 已有12人参与

提的RNA电泳检测,A260/A280基本都子在2.0左右,但是A260/A230的比值十分低值,都在0.5左右……请教,怎么才能改善
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★
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scelab(金币+1): 2010-04-27 22:47
你的样品被碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂污染,需要纯化样品。
2楼2010-04-27 17:32:27
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我和我自己

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2010-05-17 19:45:12:
我觉得没必要太过分的要求

可是RNA质量不好,会不会影响mRNA的提取呢?影响大么?请有经验的人赐教
RNA哪方面影响mRNA提取比较大
17楼2010-06-08 22:33:00
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普通回帖

legend0463

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
260/230代表样品的纯净度的,你的样品杂质太多了,纯化一下吧,祝你顺利
3楼2010-04-27 17:34:11
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我和我自己

铁虫 (小有名气)

请问用什么方法纯化呢?
4楼2010-04-27 17:41:59
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jieli.peng

铜虫 (初入文坛)

★ ★
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scelab(金币+1):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-30 15:56
一般这个值过低是由于样品中的污染物,如碳水化合物、多肽,Tris缓冲液等,所以尽量减少这些的残留,还有就是乙醇洗涤后要尽可能除尽乙醇,减少盐离子。
5楼2010-04-30 14:10:46
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liyong1981

金虫 (正式写手)



lstt09nk(金币+1): 2010-04-30 16:37
lstt09nk:合理~~ 2010-06-09 15:59:31
看你后续用RNA做什么实验的,一般的RT,其实不需要质量很高,只要你觉得没有分解,就可以继续往下做
6楼2010-04-30 16:36:26
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我和我自己

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-30 16:36:26:
看你后续用RNA做什么实验的,一般的RT,其实不需要质量很高,只要你觉得没有分解,就可以继续往下做

我是用来做SSH的……不知道这样的情况可不可以?
要是不可以……在哪些步骤要注意什么?或者有什么方法纯化RNA呢?
7楼2010-05-05 13:27:43
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liyong1981

金虫 (正式写手)



scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-05 15:38:11
SSH?这个方法很古老的了~

既然是做差异,那么最好要质量好的RNA,你后续还要做芯片吧,我估计的没错的话,那就尽量的把RNA质量提高上去~
8楼2010-05-05 13:37:24
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我和我自己

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-05-05 13:37:24:
SSH?这个方法很古老的了~

既然是做差异,那么最好要质量好的RNA,你后续还要做芯片吧,我估计的没错的话,那就尽量的把RNA质量提高上去~

确实比较古老……不过,只是硕士,先测序分析,能往后最好
可是怎么才能把RNA的质量搞上去……哎
9楼2010-05-05 15:00:10
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):很热心~~ 2010-06-09 16:01:34
据说,,,可以用kit提,我以前是用的英杰的TRAZOL提的,效果也还很好,我就没测什么比值,一看三条带,很锐利,OK。就往下做了,做的是RACE,也还是不错的
10楼2010-05-05 15:11:55
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