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我和我自己

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于RNA提取的已有12人参与

提的RNA电泳检测,A260/A280基本都子在2.0左右,但是A260/A230的比值十分低值,都在0.5左右……请教,怎么才能改善
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铁虫 (小有名气)

请问用什么方法纯化呢?
4楼2010-04-27 17:41:59
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铁虫 (小有名气)

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Originally posted by liyong1981 at 2010-04-30 16:36:26:
看你后续用RNA做什么实验的,一般的RT,其实不需要质量很高,只要你觉得没有分解,就可以继续往下做

我是用来做SSH的……不知道这样的情况可不可以?
要是不可以……在哪些步骤要注意什么?或者有什么方法纯化RNA呢?
7楼2010-05-05 13:27:43
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-05-05 13:37:24:
SSH?这个方法很古老的了~

既然是做差异,那么最好要质量好的RNA,你后续还要做芯片吧,我估计的没错的话,那就尽量的把RNA质量提高上去~

确实比较古老……不过,只是硕士,先测序分析,能往后最好
可是怎么才能把RNA的质量搞上去……哎
9楼2010-05-05 15:00:10
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 快乐由自己go at 2010-05-05 16:04:01:
建议用异丙醇重新沉淀后,用70%乙醇多洗几次,主要去除小离子类。试试看吧,希望会有帮助

多次洗涤和洗涤两次的做了对比,差异不大,可能为多糖这类物质
15楼2010-06-08 22:29:45
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by haosmile at 2010-05-16 22:47:08:
实在不行就重提吧,总卡在这步也不是件事

一直重提,还是卡在这个
16楼2010-06-08 22:31:07
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铁虫 (小有名气)

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Originally posted by zcqcau at 2010-05-17 19:45:12:
我觉得没必要太过分的要求

可是RNA质量不好,会不会影响mRNA的提取呢?影响大么?请有经验的人赐教
RNA哪方面影响mRNA提取比较大
17楼2010-06-08 22:33:00
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by fwks3518 at 2010-06-10 00:03:50:
qiagen的RNA mini kit试剂盒,用来纯化总RNA

这个试剂盒主要是解决哪方面的问题呢?
21楼2010-07-05 15:36:08
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