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李忠虎

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-26 17:23
我觉得是DNA模板质量不高，或者是反应混合物被污染了
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21楼2010-04-25 20:15:09
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 李忠虎 at 2010-04-25 20:15:09:
我觉得是DNA模板质量不高，或者是反应混合物被污染了

我也觉得是模板质量不好，但老师说可以，挺好的，真不知道是咋回事？
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22楼2010-04-26 16:50:53
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 李忠虎 at 2010-04-25 20:15:09:
我觉得是DNA模板质量不高，或者是反应混合物被污染了

每次做都是这样，管有没有条带，整个泳道都是白的，不知道啥原因
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23楼2010-04-26 16:51:50
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六妖妖

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-30 10:26
楼上很多同志都说你的模板质量有问题了。PCR抑制剂过多吧。不知道你是用什么方法提取的。换个提取方式试试会不会有所改变。对提取过程中的试剂配制会不会带入太多的杂质。
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24楼2010-04-29 16:00:12
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-30 15:48
PCR有时候很不稳定，我还是建议你换模板，或者跑个梯度，希望对你有所帮助
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25楼2010-04-29 16:52:45
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邓远洪dyh

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还有一个就是胶制好后要放置一段时间，最好放于4度TAE中冷一下
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26楼2010-04-30 09:20:32
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-30 15:48
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-29 16:52:45:
PCR有时候很不稳定，我还是建议你换模板，或者跑个梯度，希望对你有所帮助

我觉得基因这东西，你对自己的实验是最熟悉的，哪个地方有疏漏，自己应该知道，认真点，再试试吧，总会出来原因的
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严于律己，宽以待人
27楼2010-04-30 10:43:35
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 六妖妖 at 2010-04-29 16:00:12:
楼上很多同志都说你的模板质量有问题了。PCR抑制剂过多吧。不知道你是用什么方法提取的。换个提取方式试试会不会有所改变。对提取过程中的试剂配制会不会带入太多的杂质。

我是用CTAB法提的小麦叶片的基因组DNA，还有就是我这是转基因植株
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28楼2010-04-30 15:46:41
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honjie

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
把模板（估计你提的是gDNA吧）做倍比稀释，然后跑模板浓度梯度试试看，举个例子，我曾用单蚊提过gDNA，然后50ul溶解，再稀释10000倍，取5ul为模板进行PCR，一样可以扩增出条带的。
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29楼2010-04-30 15:51:28
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-29 16:52:45:
PCR有时候很不稳定，我还是建议你换模板，或者跑个梯度，希望对你有所帮助

我总共提了2000多份样品，都检测好几百分了，就出来了56个有目的基因，其他的一P就如前面的图一样，梯度也跑了，结果都是一个样子，还有就是我的阳性对照每次P都会出，就是样品不出。
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30楼2010-04-30 15:52:56
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