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41楼2010-05-26 12:08:45

xpb2005

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Originally posted by hhh19870612 at 2010-05-21 22:37:02:
可能是你操作过程出现错误，而这些错误没有办法看出来，一般正确的操作p出来的凝胶是比较平整的，不会像你那有，我觉得你还是重新再做一次的，慢慢做，胶体要充分凝结以后再进行电泳

我每次做的阳性对照都可以出带，也没有拖带，就是样品老出现这种问题，

赞一下

42楼2010-05-26 12:10:17

lyg7720349

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胶片显示：
没有扩增产物
最前面的是引物二聚体，说明你酶没有问题，在换下其他条件试试。

望大家都各有所获！

43楼2010-05-26 12:19:27

scien55

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模板或者酶的问题

好好学习天天向上

44楼2010-05-26 14:08:08

lixg

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试一下NEB公司的超保真酶，用其中的GC buffer，对于一些结构复杂的模板效果很好。不妨一试。

45楼2010-05-26 14:44:43

mofatuzi

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模板加太多,引物加太多,dntp加太多都会引起这样的条带,还有模板不纯,有蛋白也会这样

46楼2010-05-26 15:22:26

luozhen2008

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你的模板是用的什么呀？里面可能有RNA，RNA降解导致的泳道都是白的，建议用干净点的模板，模板尽量的少加，引物也加多了，少加点，PCR的退火温度下调点。

47楼2010-05-26 15:57:26

ulicy

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有以下几个问题：
1，pcr条件不好，需要调节镁离子浓度或者Tm温度，建议你重新跑温度梯度和镁离子梯度。
2，检查你的模板，你的有几条带是特别大，很有可能是什么污染了。
3，第三个电泳图有目标带？下面有很亮的杂带。需要你提高退火温度。如果目标带在500bp的话，你只需延伸30s就可以了。
4，第三个电泳图可以得出，你的模板确实有问题，要是标本不珍贵就重新提DNA吧，记得以后要把DNA 的质量弄好一点

48楼2010-05-26 17:10:58