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huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】taq酶加A

我用PFU酶做PCR，最后想加A，用的是dNTP,能保证最后加的是A吗？不是很明白啊，有哪位高手指点一下～～谢谢

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1楼 2010-03-30 18:25:33

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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1949stone(金币+1): 2010-03-31 08:35

taq酶的特性就是加A,不加别的.

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2楼2010-03-30 21:17:32

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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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肯定不行。
好像是在反应里添加一些Taq酶就可以了

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3楼2010-03-30 21:18:37

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sutao1979

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小木虫10年groupleader

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1949stone(金币+1): 2010-03-31 08:36

the protocol is following:
1. Use 1–2μl of the DNA fragment.
2. Add 1μl of Taq DNA Polymerase Reaction 10X Buffer.
3. Add 1μl of 25mM MgCl2
4. Add dATP to a final concentration of 0.2mM.
5. Add 5 units of Taq DNA Polymerase.
6. Add Nuclease-Free Water to a final volume of 10μl.
7. Incubate at 70°C for 30 minutes.

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会当凌绝顶，一览众山小