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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】BAC 文库电转化不成功
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yew123et

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】BAC 文库电转化不成功 已有1人参与

使用电洗脱平均100kb的HMWDNA 与epicentre的PCC1BAC载体连接，promega的T4连接酶和2xbuffer 连接。电转化使用的是BTX 公司的ECM399 电转仪1200v进行转化。
涂板后完全不长菌落。请问各位大侠是什么问题，或者哪位大侠能给指点一下如何发现问题所在。
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1楼 2010-03-25 09:50:23
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gandalf886

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-25 12:38
电压是不是低了点，好像一般大肠在1.8kV左右比较合适。
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2楼2010-03-25 10:22:59
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yew123et

新虫 (初入文坛)
这个电压是不是和仪器有关系啊，不同的仪器电压会一样吗？谢谢。如果您有BAC库的经验，能不能请您留个联系方式？我还有问题想问呢
引用回帖:
Originally posted by gandalf886 at 2010-03-25 10:22:59:
电压是不是低了点，好像一般大肠在1.8kV左右比较合适。

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3楼2010-03-25 10:26:55
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gandalf886

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没做过BAC文库，但是经常做大肠电转，也是用BTX ECM399，用1.7-1.8kv，2mm的电转杯
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4楼2010-03-25 13:17:05
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yew123et

新虫 (初入文坛)
恩 太好了 谢谢 我去试试
引用回帖:
Originally posted by gandalf886 at 2010-03-25 13:17:05:
没做过BAC文库，但是经常做大肠电转，也是用BTX ECM399，用1.7-1.8kv，2mm的电转杯

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5楼2010-03-25 13:26:35
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goodboy1234

新虫 (初入文坛)
1mm的电专杯我都打1800V的。
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6楼2011-03-22 15:59:32
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