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[交流]
【求助/交流】纤维素酶活测定
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| 筛选纤维素降解菌时，利用刚果红平板筛选到一些有降解纤维素作用的菌株，但是，在利用DNS法测纤维素酶活时，却测不出酶活，对照组和实验组的颜色和吸光度差不多，这是咋回事啊？测酶活时，需要注意什么问题啊？希望能给予详细的解答，万分感激！ |
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2楼2010-03-11 13:51:08
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4楼2010-03-11 22:52:25
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8楼2010-03-16 11:46:55
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sipibio(金币+1): 2010-03-16 22:37
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加大接种量是可行的，但是对于从产生降解圈的真菌中筛选出发酵上清液酶活力较强的一批菌中，没必要扩大培养，因为太耗费时间了。因为如果要比较出最强的真菌，那就应该选用同样的操作，比如同样的培养基、培养条件和接种量（精确到孢子量为10的多少次方个每毫升），而且要比较发酵上清液酶活力曲线，选出产酶高且快的菌株。 有降解圈只表示在平板上培养的时候产酶，至于液体培养产酶量多或者少就难说了。 对照颜色深是表示发酵上清液里含有酶，因为真菌首先产酶降解了培养基里的纤维素产生还原糖摄入碳源才能生长。但是一般还原糖浓度降低之后才是酶活力最高的时候，起码在我的实验里都是这样的。但是如果真菌本来产酶不多，那也有可能一直测不到酶活力。 |
9楼2010-03-16 13:24:39
10楼2010-03-16 22:37:02
40