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【求助/交流】纤维素酶活测定
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sipibio
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[交流]
【求助/交流】纤维素酶活测定
筛选纤维素降解菌时,利用刚果红平板筛选到一些有降解纤维素作用的菌株,但是,在利用DNS法测纤维素酶活时,却测不出酶活,对照组和实验组的颜色和吸光度差不多,这是咋回事啊?测酶活时,需要注意什么问题啊?希望能给予详细的解答,万分感激!
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2010-03-10 17:40:30
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amisking:可以把这个话题发帖讨论! 2010-03-16 12:31
sipibio(金币+1): 2010-03-16 22:35
我的疑问是用DNS法测内切酶活力时,有明显的颜色反应(一般测酶活的话对照组经过煮沸后加DNS应该不显色的),但我的实验组和对照组的颜色深浅差不多,且都有比较深上的颜色。对于对照组的处理也用过很多方法,结果还是一样,所以测不出酶活。
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8楼
2010-03-16 11:46:55
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sipibio(金币+1): 2010-03-11 21:25
我也遇到过同样的问题。到目前为止还没找到解决办法,自认为是筛出的菌本身就没有多大的内切酶酶活,之所以有水解圈可能是别的作用
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2楼
2010-03-11 13:51:08
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sipibio
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引用回帖:
Originally posted by
王雨云
at 2010-03-11 13:51:08:
我也遇到过同样的问题。到目前为止还没找到解决办法,自认为是筛出的菌本身就没有多大的内切酶酶活,之所以有水解圈可能是别的作用
哇,不是吧,我也想到有可能是这个原因,可总不能所有的菌都是这种情况吧?再说好多文献上都普遍用这种方法做的,总不能这么不幸吧,肯定哪有问题
你的发酵时间是几天啊,酶估计后期才能产生!
我正在努力解决!!!
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3楼
2010-03-11 21:28:15
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sipibio(金币+1): 2010-03-12 18:38
接种量影响产酶;每个真菌都有产酶曲线;DNS法测纤维素酶活是普遍用的方法,已被证明是可行的;真菌在平板上和液体培养时所处条件不同,产酶也不同,降解圈与液体酶活力不成什么比例。但是初筛也只能是遵循某个原则,降解圈是最常用的初筛指标。
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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼
2010-03-11 22:52:25
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