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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】纤维素酶活测定
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sipibio

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纤维素酶活测定

筛选纤维素降解菌时，利用刚果红平板筛选到一些有降解纤维素作用的菌株，但是，在利用DNS法测纤维素酶活时，却测不出酶活，对照组和实验组的颜色和吸光度差不多，这是咋回事啊？测酶活时，需要注意什么问题啊？希望能给予详细的解答，万分感激！
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好好的
1楼 2010-03-10 17:40:30
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sipibio

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2010-03-12 09:29:22:
初筛后的菌株经过摇瓶培养获得较高表达的纤维素酶可能才有能测定的酶活，测酶活时适当延长在最适温度下的反应时间。。。

恩，我会尝试一下的，谢谢
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好好的
7楼2010-03-12 18:47:14
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王雨云

金虫 (小有名气)
sipibio(金币+1): 2010-03-11 21:25
我也遇到过同样的问题。到目前为止还没找到解决办法，自认为是筛出的菌本身就没有多大的内切酶酶活，之所以有水解圈可能是别的作用
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2楼2010-03-11 13:51:08
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sipibio

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 王雨云 at 2010-03-11 13:51:08:
我也遇到过同样的问题。到目前为止还没找到解决办法，自认为是筛出的菌本身就没有多大的内切酶酶活，之所以有水解圈可能是别的作用

哇，不是吧，我也想到有可能是这个原因，可总不能所有的菌都是这种情况吧？再说好多文献上都普遍用这种方法做的，总不能这么不幸吧，肯定哪有问题
你的发酵时间是几天啊，酶估计后期才能产生！

我正在努力解决！！！
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好好的
3楼2010-03-11 21:28:15
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
sipibio(金币+1): 2010-03-12 18:38
接种量影响产酶；每个真菌都有产酶曲线；DNS法测纤维素酶活是普遍用的方法，已被证明是可行的；真菌在平板上和液体培养时所处条件不同，产酶也不同，降解圈与液体酶活力不成什么比例。但是初筛也只能是遵循某个原则，降解圈是最常用的初筛指标。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-03-11 22:52:25
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