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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】纤维素酶活测定
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sipibio

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纤维素酶活测定

筛选纤维素降解菌时，利用刚果红平板筛选到一些有降解纤维素作用的菌株，但是，在利用DNS法测纤维素酶活时，却测不出酶活，对照组和实验组的颜色和吸光度差不多，这是咋回事啊？测酶活时，需要注意什么问题啊？希望能给予详细的解答，万分感激！
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好好的
1楼 2010-03-10 17:40:30
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sipibio

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-03-11 22:52:25:
接种量影响产酶；每个真菌都有产酶曲线；DNS法测纤维素酶活是普遍用的方法，已被证明是可行的；真菌在平板上和液体培养时所处条件不同，产酶也不同，降解圈与液体酶活力不成什么比例。但是初筛也只能是遵循某个原 ...

那是不是应该适当加大接种量啊，我正在尝试首先在种子培养基中扩大培养几天，然后再转接到发酵产酶培养基中，这样也许可以改善一下接种量少的问题。。。

降解菌的大小与酶活确实不成什么比例，但是，存在降解圈是否就能说明该菌株分泌纤维素酶呢,只是有可能酶活低一些？难道存在降解圈也有可能不产纤维素酶吗？
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好好的
6楼2010-03-12 18:43:29
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王雨云

金虫 (小有名气)
sipibio(金币+1): 2010-03-11 21:25
我也遇到过同样的问题。到目前为止还没找到解决办法，自认为是筛出的菌本身就没有多大的内切酶酶活，之所以有水解圈可能是别的作用
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2楼2010-03-11 13:51:08
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sipibio

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 王雨云 at 2010-03-11 13:51:08:
我也遇到过同样的问题。到目前为止还没找到解决办法，自认为是筛出的菌本身就没有多大的内切酶酶活，之所以有水解圈可能是别的作用

哇，不是吧，我也想到有可能是这个原因，可总不能所有的菌都是这种情况吧？再说好多文献上都普遍用这种方法做的，总不能这么不幸吧，肯定哪有问题
你的发酵时间是几天啊，酶估计后期才能产生！

我正在努力解决！！！
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好好的
3楼2010-03-11 21:28:15
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
sipibio(金币+1): 2010-03-12 18:38
接种量影响产酶；每个真菌都有产酶曲线；DNS法测纤维素酶活是普遍用的方法，已被证明是可行的；真菌在平板上和液体培养时所处条件不同，产酶也不同，降解圈与液体酶活力不成什么比例。但是初筛也只能是遵循某个原则，降解圈是最常用的初筛指标。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-03-11 22:52:25
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