24小时热门版块排行榜    

查看: 1274  |  回复: 2

slee83

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于绿色荧光蛋白的冰冻切片 已有2人参与

大家好,本人最近在做表达荧光蛋白的组织的冰冻切片。根据一个文献上的方法,就是组织取材之后,用含4%的福尔马林、7%饱和苦味酸和10%蔗糖的固定液固定,然后用冷冻切片包埋剂包埋在液氮上冻结,冰冻切片。之后观察,发现实验组(注射了含有绿色荧光蛋白基因的质粒)和空白组都是一样都有绿色的荧光,载玻片上,只要有组织的地方,都能看到绿色的荧光。按道理来说,应该只有实验组才能观察到荧光的,所以,现在都不知道是为什么导致这样的结果。

请问有没有谁做过这方面的实验的?能告诉我具体是怎么做的吗?如是否固定了?若固定了,用什么做为固定,固定的程序是怎样的?切片后,荧光观察之前,还需要怎样处理吗?谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

celeryliu

新虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你这个绿色的光应该是背景光吧
引用回帖:
Originally posted by slee83 at 2010-01-11 22:39:36:
大家好,本人最近在做表达荧光蛋白的组织的冰冻切片。根据一个文献上的方法,就是组织取材之后,用含4%的福尔马林、7%饱和苦味酸和10%蔗糖的固定液固定,然后用冷冻切片包埋剂包埋在液氮上冻结,冰冻切片。之后观 ...

2楼2011-02-18 09:32:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thq210

木虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我最近也在做类似的切片,由于组织拍完荧光照片后还要用于原位杂交,所以直接是将组织PFA固定后,放入0.5M用PBS配置的蔗糖,等组织沉淀后 再用OCT包埋。切片后在拍照也能看到荧光。
建议一张片子上最好有对照组织,那样在拍照的时候,调节曝光度的时候有一个对照。
3楼2011-04-03 17:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 slee83 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 娱乐 +3 Tide man 2026-08-03 3/150 2026-08-04 09:58 by gltch
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 17/850 2026-08-04 09:46 by archvillain
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 09:27 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 09:17 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:15 by v1TJC4qJauAB
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +12 winnerche 2026-07-29 16/800 2026-08-04 08:18 by Equinoxhua
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 10/500 2026-08-04 08:05 by 88817753
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液,是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
请填处理意见