| 查看: 2618 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
gentledragon金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助】肝微粒体不代谢--急死人啦 已有5人参与
|
||
|
求教肝微粒体体外代谢实验问题： 我从sigma订购的鼠肝微粒体M9066，NADPH，按照文献报道的方法试验却发现检测不到代谢产物，底物量也不见减少。请同道中人指教，不胜感激！ 为了鉴定乌头碱的体外代谢产物，0.5ml反应体系含150mM Tris-HCl 缓冲液（pH=7.4），5mM MgCl2， 1mg/ml 微粒体蛋白和40uM乌头碱，反应体系在37度预孵育3分钟后，向体系中加入50uL NADPH（20mM/L）启动反应，震荡水浴上孵育60分钟，而后向体系中加入4mL冰冷的二氯甲烷终止反应，涡旋震荡后4500g离心10分钟，取有机相3.5mL氮气吹干，而后用250uL流动相溶解进样。 按此法操作后，并未像文献中报道的那样发生代谢，而后改进缓冲液，即向缓冲液中加入甘油/EDTA/DTT，仍未见代谢发生，又有人说向体系中饱和氧气会好些，依法做后仍未见代谢，遂求高人指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
309求调剂
已经有8人回复
-
一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历
已经有8人回复
-
求调剂
已经有5人回复
-
求化学调剂
已经有5人回复
-
085600，材料与化工321分求调剂
已经有10人回复
-
0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分
已经有5人回复
-
一志愿南开大学0710生物学359求调剂
已经有3人回复
-
085600，专业课化工原理，320分求调剂
已经有4人回复
-
材料与化工272求调剂
已经有16人回复
-
290求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 注射给药会经过肝脏的消除和代谢么？
已经有13人回复
- 6磷酸葡萄糖脱氢酶可以用磷酸缓冲液吗？
已经有14人回复
- 需要在肝脏代谢后才有活性的药物有哪些
已经有3人回复
- 求英语翻译啊！！！有急用啊！！拜托拜托～
已经有3人回复
- 肝微粒体的体外代谢
已经有8人回复
- 有人用NADPH做过实验吗
已经有23人回复
- 体外肝微粒体代谢问题
已经有10人回复
- 急！！！关于肝微粒体一相代谢和二代UGT的问题
已经有9人回复
- 肝微粒体代谢问题
已经有8人回复
- [求助] 肝微粒体制备方法
已经有2人回复
- 人肝微粒体体外代谢的问题
已经有12人回复
- 大鼠肝微粒怎么制备？？急~~
已经有8人回复
- 无知新手求助，有关肝微粒体，NADPH
已经有3人回复
- 【求助】错过确认报名的时间，怎么办，急死了
已经有25人回复
- 【求助】求教肝微粒体体外代谢实验问题
已经有20人回复
3楼2010-01-08 18:22:15
ronaldoli198311
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 10401.1
- 红花: 3
- 帖子: 788
- 在线: 191.9小时
- 虫号: 541442
- 注册: 2008-04-07
- 性别: GG
- 专业: 太阳和太阳系
4楼2010-01-09 15:45:04
gentledragon
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 984.2
- 帖子: 439
- 在线: 35.6小时
- 虫号: 481447
- 注册: 2007-12-17
- 性别: GG
- 专业: 质谱分析
5楼2010-01-12 21:31:30
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回贴！ 1-19 20:48
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回贴！ 1-19 20:48
| 自制肝微粒体不行吗？我也是做药物代谢的，肝微粒体都是自己制备，检测活性之后就加药代谢，制备完毕马上进行代谢实验，活性还是没问题的 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
gentledragon6楼2010-01-13 09:04:33
