| 查看: 4373 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
daifeng银虫 (小有名气)
|
[交流]
以NADH为底物的酶的酶活测定 已有7人参与
|
||
|
NADH在340nm处有吸光值，我现在利用的酶能氧化NADH成NAD+,所以在测定该酶的酶活时，是利用其在340nm处吸光值的减小来算的，另外我用的是752型分光光度计，在测定中有几个疑问，想请教一下各位虫友： 1、吸光值降低到负值，对酶活的测定影响大吗？ 2、在测定中每次吸光值都是降到-0.097，而且在加入一个物质时，酶活降低了将近50%，吸光值还是降到-0.097，这是什么原因呢？ 3、在后面的实验中，又发现的是：空白对照后，在放入样品前，发现其吸光值也是-0.097，那么对“2、”能给出的是什么结论呢？ 我在这先谢过各位虫友啦^_^ |
回复此楼» 猜你喜欢
336求调剂
已经有5人回复
-
277材料科学与工程080500求调剂
已经有6人回复
-
333求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有8人回复
-
298求调剂
已经有4人回复
-
306求0703调剂一志愿华中师范
已经有5人回复
-
299求调剂
已经有7人回复
-
26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂
已经有6人回复
-
初试 317
已经有5人回复
-
296求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 第一次做酶活力测定，跟大家交流交流
已经有4人回复
- 细菌脂肪酶活性的测定
已经有12人回复
- 请问有没有大侠知道真菌漆酶酶活的测定方法，感激不尽
已经有4人回复
- 请教脂肪酶活性测定
已经有14人回复
- 测定米曲霉酶活为负值
已经有16人回复
- 测定酶活力时酶和底物如何处理才合理？
已经有8人回复
- 【求助/交流】磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）的测定方法
已经有9人回复
- 【求助/交流】固定化酶的底物量如何确定
已经有8人回复
- 【求助/交流】酶活测定
已经有7人回复
- 【求助/交流】粗酶液酶活测定
已经有28人回复
- 【求助/交流】枯草中表达外源基因，有蛋白，但是没有酶活，是什么原因？
已经有4人回复
- 【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法
已经有17人回复
happywoheni
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 144.8
- 红花: 1
- 帖子: 54
- 在线: 24.5小时
- 虫号: 1012188
- 注册: 2010-05-05
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2010-05-18 13:08:51
红多多
木虫 (正式写手)
版筑饭牛的日子
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2295.5
- 红花: 7
- 帖子: 340
- 在线: 22.3小时
- 虫号: 303085
- 注册: 2006-12-03
- 专业: 生物化学
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+4,VIP+0): 11-9 17:41
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+4,VIP+0): 11-9 17:41
|
吸光是正值说明你的样品将光源的光吸收了一部分，要是为负值……是不是说你的样品有自发关现象？所以我觉得你是不是应该用你反应完了的样品，也就是NAD+（-0.097）的这个来调零，这样你在测定的值就是正值了。 另外你的问题1 可能会有影响，在负值时线性关系可能会不好。 问题2 酶活降低，最终生成物浓度不变，这个说明你的酶量降低了一半，或者是有竞争性抑制剂在作用。问题3 这说明你的空白样有吸收，用NAD+（-0.097）调零试试吧，这个对2好像没什么影响吧。 个人观点，不一定正确，等待高人指点 |
2楼2009-11-09 11:20:11
3楼2009-11-09 14:12:56
4楼2009-11-09 17:08:06
