[交流] 【求助/交流】磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）的测定方法

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有111人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼2010-08-25 09:21:28

xulanzzz

金虫 (著名写手)

应助: 4 (幼儿园)
贵宾: 0.001
金币: 596.8
散金: 724
红花: 14
帖子: 1086
在线: 359.9小时
虫号: 730915
注册: 2009-03-25
性别: MM
专业: 抗体工程学

木一木一(金币+1): 2010-08-26 17:02:06

你可以用磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶pyruvic acid carboxylase 作为筛选词学术搜索很多的我之前找过但是后来没继续就删掉了

DOBEST

2楼2010-08-25 09:27:13

木一木一

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 44.1
帖子: 6
在线: 2.9小时
虫号: 1075406
注册: 2010-08-16
专业: 农学

谢谢

搜了很多文章，也看了植物生理书上一些方法，但在实际操作过程中还是存在很多问题，重复测定时数值变化幅度很大。今天有个师兄竟然说要把检测液加热到30度，因为酶反应最始温度是30度，他加热后2min吸光值就不变化了，不知道到底要怎么做才能让数值稳定点

3楼2010-08-26 17:08:42

lovelylvnan

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 37.2
散金: 1
帖子: 4
在线: 58分钟
虫号: 919827
注册: 2009-12-03
专业: 食品科学

把你的邮箱发给我，我现在正在做这个，查了好多文献。

4楼2010-12-17 17:48:55

yukai513

银虫 (初入文坛)

MolEPI: 1
应助: 0 (幼儿园)
金币: 273.3
帖子: 7
在线: 14.5小时
虫号: 889906
注册: 2009-10-31

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3, EPI+1): good！ 2011-04-25 21:57:20

可以通过测定NADH在340nm下的吸光度变化来测定酶活，反应液中以PEP为底物，加入下一步催化反应酶苹果酸脱氢酶，苹果酸脱氢酶催化草酰乙酸生成苹果酸消耗NADH，通过这个消耗NADH的变化来测定PEPC的酶活。我暂时用高效液相色谱测定草酰乙酸含量呢，效果也不是很好。

赞一下(3人)

5楼2011-04-25 21:13:46

君心可晴

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 87.5
帖子: 12
在线: 9.1小时
虫号: 926668
注册: 2009-12-13
专业: 生物化学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

补充楼上：此方法也可用来测定磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶的活性，原理相同。另外，此反应的终止试剂为ATP, 氯化锰和草酰乙酸。实验终止后方进行吸光度的测定。

赞一下(1人)

6楼2011-12-06 19:26:58

jiaoliu007

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 21
帖子: 2
在线: 1.2小时
虫号: 1675523
注册: 2012-03-08
专业: 作物栽培与耕作学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

2410840楼: Originally posted by yukai513 at 2011-04-25 21:13:46
可以通过测定NADH在340nm下的吸光度变化来测定酶活，反应液中以PEP为底物，加入下一步催化反应酶苹果酸脱氢酶，苹果酸脱氢酶催化草酰乙酸生成苹果酸消耗NADH，通过这个消耗NADH的变化来测定PEPC的酶活。我暂时用高效 ...

我是设定了2min内NADH吸光值的变化来测定PEPC的酶活，前三四十秒，吸光值下降很明显，以后几乎不变，这是怎么回事啊？谢谢啊！

7楼2012-06-20 11:20:19