24小时热门版块排行榜    

查看: 1327  |  回复: 20
当前主题已经存档。

w.king124

金虫 (正式写手)


[交流] 基因组DNA做PCR时,最下面很亮的带是什么啊

把目的基因转到真核生物中表达,提基因组DNA,先做个了PCR,看是否整合到基因组中,不知道为什么会出现那么多杂带?最底下那条很亮的带是什么呢?我设计的引物没有二聚体啊


见图,从左至右依次为Marker,不同浓度模板六个泳道,以质粒做模板P的阳性对照,无模板的阴性对照

补充一下,我提的基因组DNA应该是没有问题的,OD260/OD280为1.81,电泳结果显示也是很亮的单条带

[ Last edited by w.king124 on 2009-10-16 at 16:45 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

luckyan110


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
低于100bp都是引物二聚体 挺常见的
12楼2009-10-17 10:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不是引物二聚体就是RNA,RNA没有处理干净,我也经常用genomic DNA跑PCR鉴定转基因植物,建议你加DMSO跑,提高退火温度
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2009-10-16 16:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-10-16 16:38:
不是引物二聚体就是RNA,RNA没有处理干净,我也经常用genomic DNA跑PCR鉴定转基因植物,建议你加DMSO跑,提高退火温度

应该可以排除二聚体和RNA的可能
3楼2009-10-16 16:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

delia1013

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
就是引物二聚体啊,我拿酵母cDNA批的时候也这样,目的条带比较淡,下面最亮的就是引物聚合了,不用管啦~~切你的带就可以啦~~
4楼2009-10-16 16:57:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heismeng

金虫 (小有名气)

5楼2009-10-16 18:16:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最下面的肯定是引物二聚体,基因组DNA怎么会是单条带呢?
6楼2009-10-16 23:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoliang38

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的条带太亮了吧 EB加多少啊
7楼2009-10-16 23:19:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)

引物二聚体
8楼2009-10-17 00:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhlxhl

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是引物二聚体的,因为随后一个阴性很亮~~ 不是软件设计没有二聚体就一定不会有的
9楼2009-10-17 01:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fykxy_206

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
marker 最后一个条带是多大?
10楼2009-10-17 07:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 w.king124 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +3 17501029541 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:47 by Txy@872106
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +3 我爱学电池 2026-03-23 3/150 2026-03-23 17:16 by AZMK
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
信息提示
请填处理意见