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stickfrom

金虫 (小有名气)

对啊,你用的maker几啊?我觉得可能是引物二聚体。
11楼2009-10-17 08:58:43
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luckyan110


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
低于100bp都是引物二聚体 挺常见的
12楼2009-10-17 10:43:33
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sihuanchen

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提高退火温度为什么可以避免引物二聚体产生呢?
13楼2009-10-17 11:05:01
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rava

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
相当常见,dimer或hairpin等二级结构的引物容易产生这种条带,软件设计没有dimer、crossdimer等只是表明这对引物有利于扩出目标条带。不需要管,提高退火温度照样有。非特异性带跟引物设计和PCR条件都有关,先调条件再改引物吧,你引物浓度太高或者循环数过多必居其一。
带亮得刺眼是提高对比度的结果。
14楼2009-10-17 11:06:29
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w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-16 23:06:
最下面的肯定是引物二聚体,基因组DNA怎么会是单条带呢?

确实是单条带啊,当时不过是为了看看有没有拖尾的,就没保存
15楼2009-10-17 13:10:36
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w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by rava at 2009-10-17 11:06:
相当常见,dimer或hairpin等二级结构的引物容易产生这种条带,软件设计没有dimer、crossdimer等只是表明这对引物有利于扩出目标条带。不需要管,提高退火温度照样有。非特异性带跟引物设计和PCR条件都有关,先调条 ...

引物在体系中的浓度是1uM,可能有点高把
16楼2009-10-17 13:23:23
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w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by stickfrom at 2009-10-17 08:58:
对啊,你用的maker几啊?我觉得可能是引物二聚体。

DL2000的Marker,最下面的是100bp
17楼2009-10-17 13:25:41
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huzhihong-

新虫 (小有名气)


pcr最后一步72度10分钟目的是什么???


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一直不明白这个原因,请教一下
18楼2009-10-17 21:40:09
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jjlbest

木虫 (著名写手)

是引物二聚体,因为你最后的那个泳道没有模板也出现该条带,说明是引物二聚体。
19楼2009-10-17 21:45:22
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fungi1205

金虫 (正式写手)

引物二聚体~~~~~~~~~~
加油,发挥人生最大的热量温暖身边的人
20楼2009-10-18 01:19:59
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