24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1375  |  回复: 20
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

w.king124

金虫 (正式写手)


[交流] 基因组DNA做PCR时,最下面很亮的带是什么啊

把目的基因转到真核生物中表达,提基因组DNA,先做个了PCR,看是否整合到基因组中,不知道为什么会出现那么多杂带?最底下那条很亮的带是什么呢?我设计的引物没有二聚体啊


见图,从左至右依次为Marker,不同浓度模板六个泳道,以质粒做模板P的阳性对照,无模板的阴性对照

补充一下,我提的基因组DNA应该是没有问题的,OD260/OD280为1.81,电泳结果显示也是很亮的单条带

[ Last edited by w.king124 on 2009-10-16 at 16:45 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最下面的肯定是引物二聚体,基因组DNA怎么会是单条带呢?
6楼2009-10-16 23:06:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不是引物二聚体就是RNA,RNA没有处理干净,我也经常用genomic DNA跑PCR鉴定转基因植物,建议你加DMSO跑,提高退火温度
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2009-10-16 16:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w.king124

金虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2009-10-16 16:38:
不是引物二聚体就是RNA,RNA没有处理干净,我也经常用genomic DNA跑PCR鉴定转基因植物,建议你加DMSO跑,提高退火温度

应该可以排除二聚体和RNA的可能
3楼2009-10-16 16:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

delia1013

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
就是引物二聚体啊,我拿酵母cDNA批的时候也这样,目的条带比较淡,下面最亮的就是引物聚合了,不用管啦~~切你的带就可以啦~~
4楼2009-10-16 16:57:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +3 关忆北. 2026-04-14 3/150 2026-04-14 22:53 by 梁家伟
[考研] 273求调剂 +4 白居不易. 2026-04-09 6/300 2026-04-14 19:54 by 逆水乘风
[考研] 药学305求调剂 +6 玛卡巴卡boom 2026-04-11 6/300 2026-04-14 19:48 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂学校 +11 不会吃肉 2026-04-13 12/600 2026-04-14 19:38 by Art1977
[考研] 求助调剂,跨调 +18 X十甫寸Y 2026-04-11 19/950 2026-04-14 19:26 by Art1977
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+6 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 28/1400 2026-04-14 15:44 by zs92450
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 生物学调剂 +7 纸扇zhishan 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:21 by jyl0317
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 280求调剂 +7 兮兮夜夜 2026-04-09 10/500 2026-04-12 00:33 by 蓝云思雨
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 281求调剂 +11 觉得好的吧 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:35 by 逆水乘风
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
信息提示
请填处理意见