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Western Blot 磷酸化蛋白测定问题已有8人参与
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WB菜鸟最近做ERK蛋白表达 用的碧云天的Western及IP细胞裂解液(说明说适用于磷酸化蛋白的Western检测) 伯乐半干转膜 恒压20V,25min 5%脱脂奶室温摇床封闭1h 一抗室温摇床1h,4度过夜 HRP标记的二抗室温摇床孵育1小时 TMB显色 结果:ERK蛋白表达有条带 p-ERK在NC膜上只有预染Marker没有任何条带或是背景 请教WB达人为什么p-ERK会是这样的情况,还有这个问题要怎么解决? 各位大侠赐教呀!!! [ Last edited by amisking on 2009-10-15 at 22:05 ] |
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