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jqjs

新虫 (初入文坛)

[交流] Western Blot 磷酸化蛋白测定问题已有8人参与

WB菜鸟最近做ERK蛋白表达

用的碧云天的Western及IP细胞裂解液(说明说适用于磷酸化蛋白的Western检测)
伯乐半干转膜 恒压20V,25min
5%脱脂奶室温摇床封闭1h
一抗室温摇床1h,4度过夜
HRP标记的二抗室温摇床孵育1小时
TMB显色

结果:ERK蛋白表达有条带
          p-ERK在NC膜上只有预染Marker没有任何条带或是背景

请教WB达人为什么p-ERK会是这样的情况,还有这个问题要怎么解决?
各位大侠赐教呀!!!

[ Last edited by amisking on 2009-10-15 at 22:05 ]
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