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酶切拖带和切不开的现象 已有2人参与
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求助，我在用PCR的扩增液做单酶切，之前做的好好的没什么问题，最近发现按照之前完全相同的流程酶切切不开或者切开有拖带的现象。我开封了新的引物，新的内切酶，延长了酶切时间，减小了点样时扩增液的点样量，重新提了DNA，将buffer（10x）的含量提升到了酶切体系的1/10，酶切时间从2小时、4小时到过夜都有尝试过但还是没有达到之前的水平。 请问大佬还有其他什么原因吗？万分感谢！ 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2022-09-18 18:34:04
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3楼2022-09-18 18:36:06
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6楼2022-09-19 17:14:29
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我也是按照之前的电压和胶浓度跑的，电泳液也是新配的。下一步我想除了排除气溶胶之外，试试用3%的胶，100v电压多跑一会儿（之前用的2%的，电泳120v 45min-1h）。 链接: https://pan.baidu.com/s/1_QWukaB_V9Mav23MLQCecg 提取码: 364r |
7楼2022-09-19 17:45:06
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8楼2022-09-20 20:45:46
9楼2022-09-20 22:34:35
10