应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 植物基因敲低表达，用CRISPR还是用RNAi？
51/1返回列表
查看: 3895  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hellohuo

金虫 (小有名气)

[求助] 植物基因敲低表达，用CRISPR还是用RNAi？ 已有2人参与

最近想要做植物内某个基因的沉默，一直纠结于用Crispr，还是用传统的RNAi技术，我的目的想要看该基因敲低后的相关生理状态，并不一定非要敲除，担心彻底敲除某个基因会引起其他生理反应，而不是我预期的生理现象。因此，想求教各位大神，这两个技术手段的优缺点，针对我的实验目的，有没有大神可以给点建议？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-11-26 14:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zeping_bio

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
10楼2020-12-18 14:16:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

草溪河

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hellohuo: 金币+5, ★★★很有帮助, 感谢您的回答，明白了很多！ 2021-02-20 09:38:45
基于你的描述和研究目的，建议还是做RNAi吧。通常来说，RNAi是降低基因的表达量，即knock-down，但不会完全使基因功能丧失（多数情况下），而CRISPR介导的基因敲除（knock-out），顾名思义，通过在基因编码区引入碱基缺失或插入，造成移码突变或提前终止翻译等，可以实现将基因功能完成丧失。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

hellohuo
2楼2020-11-28 13:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellohuo

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2020-11-28 13:31:27
基于你的描述和研究目的，建议还是做RNAi吧。通常来说，RNAi是降低基因的表达量，即knock-down，但不会完全使基因功能丧失（多数情况下），而CRISPR介导的基因敲除（knock-out），顾名思义，通过在基因编码区引入碱 ...

还想请教一下，基于目前所有关于敲低与敲除的实验，感觉用CRISPR的比较多，而RNAi逐渐变少了，是因为RNAi的技术存在某种问题？还是说大家都朝着新技术CRISPR发展？我觉得彻底敲除可能会造成生理功能的其他连锁变化。因为有些基因对于发育还是挺重要的，直接敲除，可能除了它本身的功能，也连带会出现别的生理变化，这种并不能说明连带的功能就是这个基因本身的功能。我觉得别人肯定也有考虑到这个问题，但是为什么大家还选择CRISPR呢？因为我对这个技术不是很了解，所以有哪些原因是我没想到的，求指教！谢谢！！！
赞一下 回复此楼
3楼2020-12-02 09:14:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草溪河

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hellohuo at 2020-12-02 09:14:29
还想请教一下，基于目前所有关于敲低与敲除的实验，感觉用CRISPR的比较多，而RNAi逐渐变少了，是因为RNAi的技术存在某种问题？还是说大家都朝着新技术CRISPR发展？我觉得彻底敲除可能会造成生理功能的其他连锁变化 ...

大家还选择CRISPR进行基因功能研究，，最主要的还是该技术可以实现基因敲除，更确定地是突变体材料的定制，理论上可以实现任意位点的核苷酸序列的改变（编辑），比如特定的编码区、结构域、顺势作用元件、内含子等。其次，CRISPR技术获得材料最后是可以不含外源T-DNA的，意味着在生产上应用的潜力加大，同时更重要的是可以在此基础上再次进行其他基因的敲除，实现多基因敲除（当合理设计携带多个sgRNA也能轻易地进行多基因敲除）。由于CRIPSR的高特异性，对于相似度极高的同源基因也能很好地实现靶基因的敲除。
选择CRISPR还是RNAi，关键取决于各自的试验内容及目的吧，毕竟这俩只是单纯的技术而已，各有有缺，合理使用即可。
你之前有相关的实验数据表明该基因敲除对发育有严重影响吗？
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

hellohuo hellohuo
4楼2020-12-02 12:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +5 医学老男孩 2026-08-13 12/600 2026-08-13 17:30 by Tide man
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 6/300 2026-08-13 15:34 by 高飞的梦想
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭