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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 谁能告诉我怎样在血液的淋巴细胞中提RNA
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hot622

[交流] 谁能告诉我怎样在血液的淋巴细胞中提RNA 已有1人参与

大家好，我是一个学分子生物学的，最近要在血液中的淋巴细胞中提取RNA，不知道如何提取，请做过有关方面实验的人能传授点经验。

我用宝生物的盒子没提出来，不知道是不是手法的问题，还有就是我想说，宝生物的catrimox-14的盒子中最后一步
（6）除去溶液，沉淀用70%的冷乙醇清洗一次。
（7）沉淀经过简单的真空干燥后，溶于适当缓冲液。
这个实在搞不明白，用冷乙醇清洗，冷乙醇是离心倒掉 还是放着真空干燥啊？还有就是真空干燥 怎么干燥，在dof管里怎么去干燥这个东西。

请做过这项实验的给个建议。谢谢了
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1楼 2009-06-16 11:53:54
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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用普通的trizol法就可以了，何必用试剂盒
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2楼2009-06-16 12:10:10
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shizhu198511

木虫 (著名写手)
★
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我也用过trizol提过，注意所用的为进口无酶就可以了，效果不错
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3楼2009-06-16 12:28:39
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hot622

trizol法的流程能介绍下吗？我第一次提  没经验啊
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4楼2009-06-16 15:49:12
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howoosoe

铁虫 (初入文坛)
★
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详查天根的网站，由各市各样的说明书，你好好看看，

我是从血细胞里的单核细胞提RNA的，需要分离出单核细胞后再用triNzol提，效果很好，千万注意不要降解RNA~!
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5楼2009-06-18 16:25:40
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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http://tools.invitrogen.com/cont ... eagent%20061207.pdf

液体样品可以用trizol LS
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6楼2009-06-18 16:44:47
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★
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冷乙醇要离心倒掉，如果是放着真空干燥那不是和没洗一样吗，离子要随着乙醇倒掉了。
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
7楼2009-06-18 18:59:42
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ligang418

金虫 (正式写手)
★
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直接用淋巴细胞分离液分出淋巴细胞，然后按照盒子提就行了！呵呵
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8楼2009-06-18 19:35:17
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radish_nana

木虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
Originally posted by howoosoe at 2009-06-18 16:25:40:
详查天根的网站，由各市各样的说明书，你好好看看，

我是从血细胞里的单核细胞提RNA的，需要分离出单核细胞后再用triNzol提，效果很好，千万注意不要降解RNA~!

你好，我也是做这个，我想请问一下，淋巴细胞中RNA的量较一般细胞中RNA量是不是少很多啊，为什么我分离出淋巴细胞的量还蛮多，为什么获得的RNA量却很少啊？你一般10的6次方的淋巴细胞可以得到多少ngRNA啊？谢谢你拉！
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期待风雨后的彩虹
9楼2010-11-20 14:05:27
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