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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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韩恋希

铜虫 (初入文坛)

[求助] 酿酒酵母基因敲除的问题已有2人参与

最近在做酿酒酵母一个受体基因的敲除,设计了上游同源臂-潮霉素筛选标记-下游同源臂,总共大概3500个碱基,用KOD扩增后回收产物,醋酸锂转化酿酒酵母,在100ug/ml潮霉素的板子上两天了一个菌都没有,想请教大神哪里出现了问题啊
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有对照吗?转化后长在没有潮霉素的板子上。排除转化问题。
然后就是效率问题
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-09-28 01:29:17
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韩恋希

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2018-09-28 01:29:17
有对照吗?转化后长在没有潮霉素的板子上。排除转化问题。
然后就是效率问题

转化试剂包括方法都是前几天才用过的,

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-09-28 20:17:15
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burma9

新虫 (小有名气)

你好,请问你的实验做出来了吗?用的酵母菌是单倍体还是双倍体啊

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-12-20 08:03:48
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fu251628849

铁杆木虫 (职业作家)

5楼2020-04-02 06:21:58
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1. 确保对照全部正常
2. 确保感受态效率足够高
3. 如果没问题,找一个熟练的人 俩人同时操作,排除手法问题
4. 上述3点前提是所用材料均正常,排除了人的原因,那就从材料上找问题

具体信息太少,无法准确判断哪里有问题
Behind the glory is a loneliness
6楼2020-04-02 08:50:51
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