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renyanbin

铁虫 (初入文坛)

[求助] 酵母蛋白His标签不挂Ni柱

求教各位大咖:
近日一直在做一个酵母表达蛋白的纯化,pPINK载体,C端带His标签,怎么都不挂Ni-NTA柱子。体系用的20mM PBS+0.35M NaCl,洗脱加0.5M咪唑,pH7.4。纯化得率只有10%。求教各位大咖。
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小树懒很好

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by renyanbin at 2018-01-06 12:55:19
换了Q柱结合效果很好,His标签不挂的问题,先放这里了,还是感谢各位的帮助。

请问楼主蛋白多大,等电点多少呢

发自小木虫Android客户端
16楼2021-04-18 23:39:15
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mlbiosci

新虫 (正式写手)

2楼2017-12-31 16:57:01
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renyanbin

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mlbiosci at 2017-12-31 16:57:01
分泌表达?

恩 是的
3楼2017-12-31 22:54:35
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awaken2013

铜虫 (小有名气)

可能的因素很多 c端his6可能会包埋 建议尝试换n端标签

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-01-01 02:19:10
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