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childchou银虫 (小有名气)
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毕赤酵母GS115表达蛋白条带大小不对 已有2人参与
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| 各位虫友,本人用PPICZαA载体在毕赤酵母GS115中表达我的目的蛋白,转化筛选都正常,甲醇诱导后取上清跑胶发现有我的目的条带(48Kda)左右,但是同时还有一条大概80Kda 的条带,硫酸铵将目的蛋白沉淀后将用PBS溶解的沉淀和剩余的上清跑胶发现上清中确实无蛋白了,而溶解后的沉淀只有80Kda的那条带了。我的蛋白是被降解了吗?想知道那个80Kda的是什么东西,还有就是PPICZαA载体表达蛋白是不是会多一段载体自身序列?我看启动子后就是Met了,然后再是我们插入的目的基因 |
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渊博震天
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childchou
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