应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 毕赤酵母GS115表达蛋白条带大小不对
71/1返回列表
查看: 1359  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

childchou

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母GS115表达蛋白条带大小不对 已有2人参与

各位虫友，本人用PPICZαA载体在毕赤酵母GS115中表达我的目的蛋白，转化筛选都正常，甲醇诱导后取上清跑胶发现有我的目的条带（48Kda）左右，但是同时还有一条大概80Kda 的条带，硫酸铵将目的蛋白沉淀后将用PBS溶解的沉淀和剩余的上清跑胶发现上清中确实无蛋白了，而溶解后的沉淀只有80Kda的那条带了。我的蛋白是被降解了吗？想知道那个80Kda的是什么东西，还有就是PPICZαA载体表达蛋白是不是会多一段载体自身序列？我看启动子后就是Met了，然后再是我们插入的目的基因
回复此楼

» 猜你喜欢
boomshakalaka
1楼 2017-12-27 11:02:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

childchou

银虫 (小有名气)
大佬们，求助。。。。。
回复此楼
boomshakalaka
2楼2017-12-27 21:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangrb10

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-26 07:53:04
如果你想知道那个80kd是什么蛋白去做个质谱就知道了，至于为什么48kd的蛋白没有了不好确定，有可能是被降解；这个质粒表达蛋白会有一个a-factor信号肽，理论上会被切除但是会存在不能完全切除的情况。
赞一下 回复此楼
3楼2017-12-29 16:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

enjoy大志

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

朋友您好，请问我可以与您交换一下菌株吗？我拿质粒，我最近着手毕赤酵母体系构建，目前只有质粒，宿主菌株没有，您可否实施点给我，或者我拿我有且对你有帮助的质粒进行交换呢？
赞一下 回复此楼
付出定有回报
4楼2018-01-16 16:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微皮蛋

新虫 (初入文坛)
楼主知道了是什么了吗，我现在也出现了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2018-01-25 20:51:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhxian

新虫 (小有名气)
楼主，可以和你换点你用的载体不？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2018-12-28 01:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
博来霉素浓度多少哇？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2018-12-28 08:27:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 childchou 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +4 瞬息宇宙 2026-08-10 4/200 2026-08-11 02:02 by 旁观2020
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 帮忙看看fileCode +4 wwncly 2026-08-10 8/400 2026-08-10 22:07 by demonstreets
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +3 Tide man 2026-08-10 3/150 2026-08-10 21:48 by GZUZM
[基金申请] filecode +8 documentary 2026-08-10 8/400 2026-08-10 19:20 by loufangrui
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +11 archvillain 2026-08-04 13/650 2026-08-10 14:41 by seekfind
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭