应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 毕赤酵母GS115表达蛋白条带大小不对
51/1返回列表
查看: 1150  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

childchou

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母GS115表达蛋白条带大小不对 已有2人参与

各位虫友，本人用PPICZαA载体在毕赤酵母GS115中表达我的目的蛋白，转化筛选都正常，甲醇诱导后取上清跑胶发现有我的目的条带（48Kda）左右，但是同时还有一条大概80Kda 的条带，硫酸铵将目的蛋白沉淀后将用PBS溶解的沉淀和剩余的上清跑胶发现上清中确实无蛋白了，而溶解后的沉淀只有80Kda的那条带了。我的蛋白是被降解了吗？想知道那个80Kda的是什么东西，还有就是PPICZαA载体表达蛋白是不是会多一段载体自身序列？我看启动子后就是Met了，然后再是我们插入的目的基因
回复此楼

» 猜你喜欢
boomshakalaka
1楼 2017-12-27 11:02:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangrb10

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-26 07:53:04
如果你想知道那个80kd是什么蛋白去做个质谱就知道了，至于为什么48kd的蛋白没有了不好确定，有可能是被降解；这个质粒表达蛋白会有一个a-factor信号肽，理论上会被切除但是会存在不能完全切除的情况。
赞一下 回复此楼
3楼2017-12-29 16:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

childchou

银虫 (小有名气)
大佬们，求助。。。。。
回复此楼
boomshakalaka
2楼2017-12-27 21:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

enjoy大志

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

朋友您好，请问我可以与您交换一下菌株吗？我拿质粒，我最近着手毕赤酵母体系构建，目前只有质粒，宿主菌株没有，您可否实施点给我，或者我拿我有且对你有帮助的质粒进行交换呢？
赞一下 回复此楼
付出定有回报
4楼2018-01-16 16:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微皮蛋

新虫 (初入文坛)
楼主知道了是什么了吗，我现在也出现了

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2018-01-25 20:51:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 293求调剂 +6 加一一九 2026-03-24 6/300 2026-03-24 14:29 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 284求调剂 +10 Zhao anqi 2026-03-22 10/500 2026-03-24 00:08 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭