24小时热门版块排行榜    

查看: 1459  |  回复: 6

childchou

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母GS115表达蛋白条带大小不对 已有2人参与

各位虫友,本人用PPICZαA载体在毕赤酵母GS115中表达我的目的蛋白,转化筛选都正常,甲醇诱导后取上清跑胶发现有我的目的条带(48Kda)左右,但是同时还有一条大概80Kda 的条带,硫酸铵将目的蛋白沉淀后将用PBS溶解的沉淀和剩余的上清跑胶发现上清中确实无蛋白了,而溶解后的沉淀只有80Kda的那条带了。我的蛋白是被降解了吗?想知道那个80Kda的是什么东西,还有就是PPICZαA载体表达蛋白是不是会多一段载体自身序列?我看启动子后就是Met了,然后再是我们插入的目的基因
回复此楼
boomshakalaka
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

childchou

银虫 (小有名气)

大佬们,求助。。。。。
boomshakalaka
2楼2017-12-27 21:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangrb10

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-01-26 07:53:04
如果你想知道那个80kd是什么蛋白去做个质谱就知道了,至于为什么48kd的蛋白没有了不好确定,有可能是被降解;这个质粒表达蛋白会有一个a-factor信号肽,理论上会被切除但是会存在不能完全切除的情况。
3楼2017-12-29 16:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

enjoy大志

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

朋友您好,请问我可以与您交换一下菌株吗?我拿质粒,我最近着手毕赤酵母体系构建,目前只有质粒,宿主菌株没有,您可否实施点给我,或者我拿我有且对你有帮助的质粒进行交换呢?
付出定有回报
4楼2018-01-16 16:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微皮蛋

新虫 (初入文坛)

楼主知道了是什么了吗,我现在也出现了

发自小木虫Android客户端
5楼2018-01-25 20:51:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhxian

新虫 (小有名气)

楼主,可以和你换点你用的载体不?

发自小木虫Android客户端
6楼2018-12-28 01:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

7楼2018-12-28 08:27:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 childchou 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[职场人生] 40+中年人失业后,还能找到好工作吗? +11 xqy2009 2026-10-13 13/650 2026-10-15 21:32 by bear2007
[有机交流] 用NBS溴化时溶剂除了CCl4外还有什么 +3 18834002860 2026-10-12 6/300 2026-10-15 14:30 by 长沙摩尔信息科�
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗? 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[硕博家园] 极限拉扯,如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了,离AI做有机合成还有多远? +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +4 好运来~9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
信息提示
请填处理意见