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小木木木222

新虫 (初入文坛)

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[求助] 如何测定蛋白浓度已有1人参与

样品中含有SDS Tris和少量脂肪，怎样测蛋白浓度？SDS影响考马斯亮蓝法，脂肪影响BCA法，样品中蛋白少，不能用凯氏定氮法。想用未变性的蛋白跑电泳，所以提取纯化蛋白后如果用变性剂溶解也不行。请教各位用什么方法可以测蛋白浓度

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1楼2017-09-12 17:28:49

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小木木木222

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引用回帖:

2楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-09-13 08:06:14
如果有脂肪等杂质将上清液加入离心过滤管中 12000rpm 5min这时得到的滤液就是蛋白液了损耗很小
如果在滤膜上还有残余的上清液请延长时间或更换离心过滤管的滤膜多次离心蛋白基本没啥损失但注意控制温度

请问温度在什么范围内？36度脂肪融点可以吗