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小木木木222

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何测定蛋白浓度 已有1人参与

样品中含有SDS Tris和少量脂肪,怎样测蛋白浓度?SDS影响考马斯亮蓝法,脂肪影响BCA法,样品中蛋白少,不能用凯氏定氮法。想用未变性的蛋白跑电泳,所以提取纯化蛋白后如果用变性剂溶解也不行。请教各位用什么方法可以测蛋白浓度
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小木木木222

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-09-13 08:06:14
如果有脂肪等杂质 将上清液加入离心过滤管中 12000rpm 5min这时得到的滤液就是蛋白液了 损耗很小
如果在滤膜上还有残余的上清液 请延长时间或更换离心过滤管的滤膜多次离心 蛋白基本没啥损失 但注意控制温度

请问温度在什么范围内?36度脂肪融点可以吗
3楼2017-09-15 10:03:05
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果有脂肪等杂质 将上清液加入离心过滤管中 12000rpm 5min这时得到的滤液就是蛋白液了 损耗很小
如果在滤膜上还有残余的上清液 请延长时间或更换离心过滤管的滤膜多次离心 蛋白基本没啥损失 但注意控制温度
从事科研工作数载,现已退休,有一些经验可以奉献给年轻人,但电脑水平不佳,还需学习。
2楼2017-09-13 08:06:14
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aishida

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

4楼2017-09-30 04:47:51
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