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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 如何测定蛋白浓度
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小木木木222

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何测定蛋白浓度已有1人参与

样品中含有SDS Tris和少量脂肪，怎样测蛋白浓度？SDS影响考马斯亮蓝法，脂肪影响BCA法，样品中蛋白少，不能用凯氏定氮法。想用未变性的蛋白跑电泳，所以提取纯化蛋白后如果用变性剂溶解也不行。请教各位用什么方法可以测蛋白浓度
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1楼2017-09-12 17:28:49
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果有脂肪等杂质 将上清液加入离心过滤管中 12000rpm 5min这时得到的滤液就是蛋白液了 损耗很小
如果在滤膜上还有残余的上清液 请延长时间或更换离心过滤管的滤膜多次离心 蛋白基本没啥损失 但注意控制温度
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从事科研工作数载，现已退休，有一些经验可以奉献给年轻人，但电脑水平不佳，还需学习。
2楼2017-09-13 08:06:14
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小木木木222

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-09-13 08:06:14
如果有脂肪等杂质 将上清液加入离心过滤管中 12000rpm 5min这时得到的滤液就是蛋白液了 损耗很小
如果在滤膜上还有残余的上清液 请延长时间或更换离心过滤管的滤膜多次离心 蛋白基本没啥损失 但注意控制温度

请问温度在什么范围内？36度脂肪融点可以吗
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3楼2017-09-15 10:03:05
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aishida

禁虫 (职业作家)
本帖内容被屏蔽
4楼2017-09-30 04:47:51
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