| 查看: 2111 | 回复: 17 | ||
[求助]
T4酶连接试验总是失败
|
||
做T4酶连接试验总是失败，连接完之后转化到DH5α中，最后做菌液PCR总是有很多杂带，请问这是啥原因，有啥改进的方法么，请各位大神指点呀  R0T)Y(G977M~S%B4`%Y(X[6.png |
回复此楼» 猜你喜欢
透明质酸酶的作用机制：如何实现药物递送
已经有0人回复
-
爱思维尔旗下LWT投稿
已经有9人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有287人回复
-
替拉扎明为缺氧选择性细胞毒药物研究提供新思路
已经有0人回复
-
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
-
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 重组质粒转化总是失败，请帮助分析下
已经有11人回复
2楼2017-09-02 15:38:56
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:30:28
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:30:28
|
连接之后可以用电泳检测，不过我觉得不太准，你可以试试。T4连接酶你们是有酶切位点还是没有的，如果有酶切位点的可以用酶切验证。没有就只有改进连接比例。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-09-02 15:57:54
5楼2017-09-02 16:12:39
6楼2017-09-02 16:22:21
cry_2013
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 1960.8
- 散金: 342
- 红花: 6
- 帖子: 366
- 在线: 246.6小时
- 虫号: 3426497
- 注册: 2014-09-18
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
7楼2017-09-02 16:22:27
点瓣心音
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4719.5
- 散金: 20
- 红花: 2
- 帖子: 255
- 在线: 74.6小时
- 虫号: 2202129
- 注册: 2012-12-23
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
8楼2017-09-02 16:51:59
yangmeng0711
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1558.5
- 散金: 66
- 帖子: 95
- 在线: 19.3小时
- 虫号: 3768914
- 注册: 2015-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
14楼2017-09-02 18:06:20
15楼2017-09-02 18:45:42
点瓣心音
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4719.5
- 散金: 20
- 红花: 2
- 帖子: 255
- 在线: 74.6小时
- 虫号: 2202129
- 注册: 2012-12-23
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
|
具体我说得不是很详细，你可以搜索北京擎科公司、奥克等公司、宝生公司等，他们都有无缝连接产品的简介。就是在连接时，你扩增出来的目的条带两端各多了15bp左右的与载体互补的碱基序列。 发自小木虫Android客户端 |
16楼2017-09-03 07:36:13
3楼2017-09-02 15:54:23
9楼2017-09-02 17:33:39
10楼2017-09-02 17:34:25
5