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筱林士人

金虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 能量车gogogo at 2017-09-02 16:22:21
非特异性条带或者是实验过程中污染到其他的DNA,非特异性条带可能是insert本身的问题,如果是实验过程中污染到其他的insert,就要注意实验条件了!

不应该呀,我做了好多组,并且做了好多次都有杂带
11楼2017-09-02 17:35:58
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筱林士人

金虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 点瓣心音 at 2017-09-02 16:51:59
如果实验室使用T4 连接克隆基因的成功案列太少,完全可以换成现在的无缝连接。

请问无缝连接您有相关的方法么能否给我分享一下,谢谢!
12楼2017-09-02 17:37:24
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筱林士人

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cry_2013 at 2017-09-02 16:22:27
T4连接要注意载体和片段的摩尔比,转化,还有细胞承受能力吧,感觉这个有时有点运气的成分在里面。。。。

这些因素我们都考虑到了,但还是不行呀
13楼2017-09-02 17:39:40
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yangmeng0711

新虫 (小有名气)

双酶切也有可能是有一种酶活性低,改为单酶切,切二次

发自小木虫IOS客户端
14楼2017-09-02 18:06:20
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能量车gogogo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 点瓣心音 at 2017-09-02 16:51:59
如果实验室使用T4 连接克隆基因的成功案列太少,完全可以换成现在的无缝连接。

请问什么叫无缝连接?
人不会永远十七岁,但永远有人十七岁
15楼2017-09-02 18:45:42
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点瓣心音

木虫 (小有名气)

具体我说得不是很详细,你可以搜索北京擎科公司、奥克等公司、宝生公司等,他们都有无缝连接产品的简介。就是在连接时,你扩增出来的目的条带两端各多了15bp左右的与载体互补的碱基序列。

发自小木虫Android客户端
16楼2017-09-03 07:36:13
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植物营养

新虫 (小有名气)

17楼2017-10-22 01:39:19
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
18楼2017-10-22 09:37:30
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