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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 原生质体PEG转化
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longevens

新虫 (初入文坛)

[求助] 原生质体PEG转化 已有1人参与

大家好，我最近在做原生质体，我的原因是在原生质体离心这一方面，8000转离心3分钟，直接倾倒，然后镜检酶解上清液，发现上清液还是有很多的原生质体。然后再次用0.7NaCl清洗离心，倾倒上清液，然后再镜检就只有一点点原生质体了根本不够做转化，所以请问大家是怎么处理上清液的呢？我现在都不敢倒了。
       还有为什么我在用STC悬浮的时候溶液会变成乳白色呢（STC溶液是澄清的，配方跟大众一样）？离心后就成了白色粘稠沉淀，镜检完全看不到原生质体了，不知道是被裹住了还是破裂了。
      非常希望您的帮助。
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Bequiet
1楼 2017-08-10 17:32:07
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longevens

新虫 (初入文坛)
各位虫友帮帮忙呀
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Bequiet
2楼2017-08-13 16:00:45
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by longevens at 2017-08-13 16:00:45
各位虫友帮帮忙呀

给你回的私信没收到？

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3楼2017-08-13 23:53:18
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awqqmxr817
4楼2017-08-19 20:40:15
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Zhenhui_Ren

新虫 (初入文坛)
我也遇到了同样的问题，请问你知道解决的办法了吗？

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5楼2017-08-21 15:12:43
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疯狂猎人888

金虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-24 23:04:23
转速太高了 ，4度 4000转 10分钟就好了，应该是高速离心原生质体破裂了。
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6楼2017-09-24 20:19:09
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小耗子偷灯油

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mochenmi at 2017-08-13 23:53:18
给你回的私信没收到？
...

同求答案为啥原生质体破了吖，我用的4000，10分钟，也是最后都没了

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7楼2018-08-23 21:54:26
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rabbit12510

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也遇到同样的问题了，请问楼主如何解决的呀
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8楼2018-11-20 16:25:19
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屎胖纸

铁虫 (小有名气)
4度离心3000转10分钟，stc悬浮后乳白是正常的呀，

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9楼2018-11-28 20:38:06
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