应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒表达载体为什么构建的不对
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
101/1返回列表
查看: 1674  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

[交流] 质粒表达载体为什么构建的不对

我的目的片段是1500bp，我用的载体是PT28，感受态用的DH5a，两种内切酶是EcoRⅠ和NedⅠ，之前目的基因p出来是1500，可是连接以后我做菌p，跑出来的条带是300bp，求大神指导啊！第一个图是目的基因的pcr，另外这个图是连接以后菌p的。maker是5k的

质粒表达载体为什么构建的不对


质粒表达载体为什么构建的不对-1


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-08-06 15:44:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ivy尘

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没接上，300bp是空菌的条带（T7/Ter）。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

拂柳飞絮
2楼2017-08-06 16:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Ivy尘 at 2017-08-06 16:06:29
没接上，300bp是空菌的条带（T7/Ter）。

空菌？是空质粒吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-08-06 16:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ivy尘

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 拂柳飞絮 at 2017-08-06 16:24:30
空菌？是空质粒吗？
...

你用特异性引物还是通用引物？如果是通用引物，就是空质粒
赞一下 回复此楼
4楼2017-08-06 16:35:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Ivy尘 at 2017-08-06 16:35:33
你用特异性引物还是通用引物？如果是通用引物，就是空质粒...

特异性引物

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2017-08-06 17:03:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提个质粒做个酶切，如果没有就是空载了，没有连接上。
赞一下 回复此楼
。
6楼2017-08-06 18:45:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2017-08-06 18:45:55
提个质粒做个酶切，如果没有就是空载了，没有连接上。

有的话条带也不对啊？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-08-06 21:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛虫222

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落PCR是一个快去检验阳性克隆的方法，但是有很多人说其准确度也不是很高，所以你需要提质粒，多提几个菌斑，做酶切，在送去测序

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

拂柳飞絮 拂柳飞絮
8楼2017-08-07 08:08:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小毛虫222 at 2017-08-07 08:08:04
菌落PCR是一个快去检验阳性克隆的方法，但是有很多人说其准确度也不是很高，所以你需要提质粒，多提几个菌斑，做酶切，在送去测序

好的，谢谢！！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
9楼2017-08-07 08:41:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

拂柳飞絮

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小毛虫222 at 2017-08-07 08:08:04
菌落PCR是一个快去检验阳性克隆的方法，但是有很多人说其准确度也不是很高，所以你需要提质粒，多提几个菌斑，做酶切，在送去测序

好的，谢谢！！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
10楼2017-08-07 08:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 拂柳飞絮 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行 +11 lllllos 2026-03-30 11/550 2026-03-30 21:19 by 研究僧导导
[考研] 286分调剂 +10 Faune 2026-03-30 11/550 2026-03-30 20:35 by 啊李999
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-27 9/450 2026-03-30 20:10 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +7 蓝月亮亮 2026-03-30 7/350 2026-03-30 19:24 by 无际的草原
[考研] 0703化学求调剂 +6 丹青奶盖 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:33 by 探123
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 考研调剂 +5 Sanmu-124 2026-03-26 5/250 2026-03-30 13:36 by chemdavid
[基金申请] 面上5B能上会吗？ +7 redcom 2026-03-29 7/350 2026-03-30 12:44 by 爱搞研究的小孩
[考研] 332求调剂 +6 Lyy930824@ 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:53 by 1172367218
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +8 柳溪边 2026-03-26 8/400 2026-03-29 20:42 by 唐沐儿
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 机械学硕310分，数一英一，一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭