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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

[交流] 质粒表达载体为什么构建的不对

我的目的片段是1500bp,我用的载体是PT28,感受态用的DH5a,两种内切酶是EcoRⅠ和NedⅠ,之前目的基因p出来是1500,可是连接以后我做菌p,跑出来的条带是300bp,求大神指导啊!第一个图是目的基因的pcr,另外这个图是连接以后菌p的。maker是5k的

质粒表达载体为什么构建的不对


质粒表达载体为什么构建的不对-1


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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by Ivy尘 at 2017-08-06 16:06:29
没接上,300bp是空菌的条带(T7/Ter)。

空菌?是空质粒吗?

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3楼2017-08-06 16:24:30
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Ivy尘

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没接上,300bp是空菌的条带(T7/Ter)。

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2楼2017-08-06 16:06:29
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Ivy尘

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 拂柳飞絮 at 2017-08-06 16:24:30
空菌?是空质粒吗?
...

你用特异性引物还是通用引物?如果是通用引物,就是空质粒
4楼2017-08-06 16:35:33
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拂柳飞絮

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Ivy尘 at 2017-08-06 16:35:33
你用特异性引物还是通用引物?如果是通用引物,就是空质粒...

特异性引物

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5楼2017-08-06 17:03:10
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