| 查看: 2227 | 回复: 13 | ||
[求助]
求助分子克隆 已有1人参与
|
||
|
最近做分子克隆，pet28a的载体，我用的是nde1和xho1两个酶切位点，菌液pcr全部是阳性，但双酶切后就是没有插入片段，请教，是否要换酶切位点？是不是pet28a载体的xhoI不好用呢 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有251人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
fengshen2005
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2622.9
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 518
- 在线: 80.2小时
- 虫号: 2251556
- 注册: 2013-01-20
- 专业: 免疫学
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-25 09:32:40
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-25 09:32:40
|
菌液PCR假阳性很高（你的片段不管是否连入载体，仍然被你铺在平板上，你挑点菌斑以外的培养基都能P出你的条带），能长出斑说明你载体没切好 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-06-25 05:49:08
伤何处
木虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 2444.9
- 散金: 88
- 红花: 32
- 帖子: 810
- 在线: 602.3小时
- 虫号: 1406557
- 注册: 2011-09-18
- 性别: GG
- 专业: 果树学
3楼2017-06-25 13:43:12
5楼2017-06-27 16:12:30
xmcw7658楼2017-06-28 16:44:39
4楼2017-06-26 01:06:23
不明非
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 62.7
- 散金: 30
- 帖子: 24
- 在线: 18.7小时
- 虫号: 4045818
- 注册: 2015-08-31
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2017-06-27 16:17:00
|
我是20ul体系切1ng，我也认为是载体没切开，但我不知道是不是这个载体上酶切位点的问题，因为其他载体我用同样的体系都没问题，不知道你有用过28a上同样的酶切位点吗？ 发自小木虫Android客户端 |
7楼2017-06-27 23:40:42
9楼2017-06-30 08:07:21
10楼2017-06-30 08:09:14