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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 感受态细胞制备
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shubing1991

新虫 (初入文坛)
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感受态细胞制备
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离心收集菌体时，菌体比较分散，不是聚集在一起，还有用悬浮液洗脱一次后，菌更散了……这样的现象是什么原因导致的？

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1楼 2017-06-19 00:39:28
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shubing1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2017-06-19 11:25:52
4500，已经可以了。我觉得你的菌是不是污染了？
...

我也怀疑是这样，这污染会是什么呢？  其他菌？还是噬菌体？  我已经很注意了

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我爱chi辣椒
15楼2017-06-19 21:32:34
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璐璐sunny

铁杆木虫 (正式写手)
★
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是正常的吧，因为转速很低啊

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8楼2017-06-19 00:42:31
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重小虫

木虫 (职业作家)
像是菌死了

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9楼2017-06-19 00:43:25
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shubing1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 璐璐sunny at 2017-06-19 00:42:31
是正常的吧，因为转速很低啊

我记得以前做的菌好像不这样？  不知道是不是和菌种有关？

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10楼2017-06-19 00:44:06
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shubing1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 重小虫 at 2017-06-19 00:43:25
像是菌死了

这个怎么判断？可有经验依据吗

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11楼2017-06-19 00:45:00
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是大肠杆菌和农杆菌，5000转完全可以离心到底部了。

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12楼2017-06-19 00:57:23
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shubing1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2017-06-19 00:57:23
如果是大肠杆菌和农杆菌，5000转完全可以离心到底部了。

做感受态怕太高转速影响效价，  我4500rpm离心  还是离不下去

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我爱chi辣椒
13楼2017-06-19 11:22:48
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
13楼: Originally posted by shubing1991 at 2017-06-19 11:22:48
做感受态怕太高转速影响效价，  我4500rpm离心  还是离不下去
...

4500，已经可以了。我觉得你的菌是不是污染了？

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14楼2017-06-19 11:25:52
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by shubing1991 at 2017-06-19 21:32:34
我也怀疑是这样，这污染会是什么呢？  其他菌？还是噬菌体？  我已经很注意了
...

你可以摇久一点，如果是噬菌体感染，菌液后面会变澄清，而且有小碎片在里面。

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16楼2017-06-19 22:47:17
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stabilized

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
增加点离心时间吧，最好别加转速。
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17楼2017-06-20 09:57:09
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小冀-

版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
污染了，要不然就是菌体裂解了
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18楼2017-06-20 11:55:09
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shubing1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 小冀- at 2017-06-20 11:55:09
污染了，要不然就是菌体裂解了

不好说，  我同时做了别菌株的，什么都一样。能离心聚集的底下一块。  我现在很怀疑是这个菌的特点。  因为能正常使用

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19楼2017-06-20 12:20:15
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大别克

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1.这个菌株本身特性导致的
2.摇菌浓度太低
3.离心转速不够
4.杂菌污染

第一点的可能性最大，本身可能不太好收菌，再加上离心转速不够。一般大肠杆菌2000g，10mim就足够了，你可以适当再提高一下转速试试
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20楼2017-08-11 10:38:00
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lx199002282楼
2017-06-19 00:39   回复  
shubing1991(金币+2): 谢谢参与
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lmg06083楼
2017-06-19 00:39   回复  
shubing1991(金币+2): 谢谢参与
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Jason-wong4楼
2017-06-19 00:39   回复  
shubing1991(金币+2): 谢谢参与
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Shawn_王5楼
2017-06-19 00:39   回复  
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岳麓君子6楼
2017-06-19 00:39   回复  
shubing1991(金币+2): 谢谢参与
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10056349617楼
2017-06-19 00:39   回复  
shubing1991(金币+1): 谢谢参与
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