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GST标签蛋白表达 已有1人参与
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有没有谁用过pGEX-6P-1这个融合表达载体啊? 我是第一次做蛋白表达这方面的东西,有很多问题不是很明白,还望得到各位帮助。 我将通过PCR方法扩增出来的一个1000kb左右大小的蛋白的DNA,利用双酶切连到pGEX-6P-1载体上。诱导表达后,能够看到一个30KD左右的表达蛋白。这里我就不是很明白了,既然是融合表达,那么表达出来的蛋白是不是应该有50多KD呢?还是并不是我想象的这样?我的目的蛋白就是30多Kd标签蛋白20多kd,加起来应该是60多kd 可是为什么每次条带都和我的目的蛋白条带一样,我的蛋白是融合蛋白吗?标签蛋白是表达了还是没有表达呢?wb也是直接用抗我的蛋白的阳性血清做的,也成功了 @hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端 |
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