| 查看: 2264 | 回复: 24 | ||
cutepigxia新虫 (正式写手)
|
[求助]
求助蓝白斑筛选的相关问题 已有1人参与
|
|
我涂的板为什么会培养基都变蓝色，而且也没有多少白菌，挑一两个看似白菌的菌落再划线到新制的含氨变青霉素，x-gal，IPTG的平板上结果都又是蓝色，想知道是什么原因，有木有人能给解释一下，谢谢！   发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有128人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
17楼2017-04-19 11:32:49
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
蓝白斑的原理是α互补。JM109的LacZ基因缺少α片段，因此，不能分解x-gal显蓝色。质粒载体上有完整的α基因序列，多克隆位点也在这段序列内 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-04-18 11:45:33
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
如果在这个位点插入了外源片段，将会破坏α阅读框，这种破坏大部分情况下会造成α基因失活。如果没有插入外源基因，α片段就可以表达，使得基因LacZ组装完整，分解x-gal显蓝色 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-04-18 11:49:09
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
出现大片的蓝斑，一是可能根本没连上外源片段，全是自连接。二是插入的片段未能使α基因失活，虽然正确插入了，却依然是显蓝斑，这种情况一般常见于插入片段小于500bp，但是也有报道插入2000bp也依然无法失活α片段，显蓝色。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-04-18 11:52:48
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2017-04-18 11:54:45
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2017-04-18 11:55:45
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2017-04-18 11:56:48
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2017-04-18 11:57:43
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2017-04-18 11:59:39
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
11楼2017-04-18 12:00:53
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
蓝色集中，可能是在平板上涂布的x-gal，应该在倒板时，待培养基不烫手时，加amp，IPTG，x-gal，混匀后倒板，才会均一。另外貌似x-gal加多了，再确认一下浓度。 发自小木虫Android客户端 |
12楼2017-04-18 12:04:05
小松鼠45
捐助贵宾 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1955.4
- 散金: 4388
- 红花: 8
- 帖子: 921
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 3109394
- 注册: 2014-04-02
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2017-04-18 10:56:52