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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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cutepigxia

新虫 (正式写手)

[求助] 求助蓝白斑筛选的相关问题 已有1人参与

我涂的板为什么会培养基都变蓝色,而且也没有多少白菌,挑一两个看似白菌的菌落再划线到新制的含氨变青霉素,x-gal,IPTG的平板上结果都又是蓝色,想知道是什么原因,有木有人能给解释一下,谢谢!

求助蓝白斑筛选的相关问题


求助蓝白斑筛选的相关问题-1


求助蓝白斑筛选的相关问题-2


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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

排除第二种,直接用通用引物做一下菌落pcr,跑胶看一下大小就行了

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9楼2017-04-18 11:57:43
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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

用JM109菌株,不要用BL21或者MG1655

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2楼2017-04-18 10:56:52
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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

蓝白斑的原理是α互补。JM109的LacZ基因缺少α片段,因此,不能分解x-gal显蓝色。质粒载体上有完整的α基因序列,多克隆位点也在这段序列内

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3楼2017-04-18 11:45:33
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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)

如果在这个位点插入了外源片段,将会破坏α阅读框,这种破坏大部分情况下会造成α基因失活。如果没有插入外源基因,α片段就可以表达,使得基因LacZ组装完整,分解x-gal显蓝色

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4楼2017-04-18 11:49:09
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