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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小松鼠45

无虫

引用回帖:
20楼: Originally posted by cutepigxia at 2017-04-19 21:51:36
嗯我昨天做了空白对照,感觉感受态细胞不太对,没进行转化的感受态细胞涂板出现了蓝色,你说的那个加体积的0.2%x-gal是参照什么书籍来的?
...

换一株新的DH5α,或者JM109,重新做感受态。记得先划线确认没问题了再做感受态。至于x-gal,参照《分子克隆实验指南》
21楼2017-04-19 22:05:48
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泰迪犬

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

1.加入氨苄的量可能太少了,浓度不够,无法合理抑制菌株生长2.上样量太多,无法均匀涂开;培养时间过长3.排除外界条件,目的基因未能成功连接到载体上

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22楼2017-04-20 10:29:42
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cutepigxia

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
21楼: Originally posted by 小松鼠45 at 2017-04-19 22:05:48
换一株新的DH5α,或者JM109,重新做感受态。记得先划线确认没问题了再做感受态。至于x-gal,参照《分子克隆实验指南》...

嗯好的,谢谢!

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23楼2017-04-20 10:31:46
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cutepigxia

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
22楼: Originally posted by 泰迪犬 at 2017-04-20 10:29:42
1.加入氨苄的量可能太少了,浓度不够,无法合理抑制菌株生长2.上样量太多,无法均匀涂开;培养时间过长3.排除外界条件,目的基因未能成功连接到载体上

好的,谢谢你的建议!

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24楼2017-04-20 10:32:29
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enjoy大志

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

全蓝的原因:ta克隆失败,发生了自连,形成完整的lacz片段,从而分解x-gal形成蓝色;部分白斑再次涂板变蓝原因:第一次涂x-gal的时候不均匀,建议在培养基50-60摄氏度的时候直接加入x-gal(多点没事),锥形瓶不离台面,摇匀。再倒平板。然后再继续后面的工作。

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付出定有回报
25楼2017-04-20 15:53:44
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