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小松鼠45

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by cutepigxia at 2017-04-19 21:51:36
嗯我昨天做了空白对照，感觉感受态细胞不太对，没进行转化的感受态细胞涂板出现了蓝色，你说的那个加体积的0.2%x-gal是参照什么书籍来的？
...

换一株新的DH5α，或者JM109，重新做感受态。记得先划线确认没问题了再做感受态。至于x-gal，参照《分子克隆实验指南》
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21楼2017-04-19 22:05:48
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泰迪犬

新虫 (初入文坛)
1.加入氨苄的量可能太少了，浓度不够，无法合理抑制菌株生长2.上样量太多，无法均匀涂开；培养时间过长3.排除外界条件，目的基因未能成功连接到载体上

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22楼2017-04-20 10:29:42
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cutepigxia

新虫 (正式写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 小松鼠45 at 2017-04-19 22:05:48
换一株新的DH5α，或者JM109，重新做感受态。记得先划线确认没问题了再做感受态。至于x-gal，参照《分子克隆实验指南》...

嗯好的，谢谢！

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23楼2017-04-20 10:31:46
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cutepigxia

新虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 泰迪犬 at 2017-04-20 10:29:42
1.加入氨苄的量可能太少了，浓度不够，无法合理抑制菌株生长2.上样量太多，无法均匀涂开；培养时间过长3.排除外界条件，目的基因未能成功连接到载体上

好的，谢谢你的建议！

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24楼2017-04-20 10:32:29
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enjoy大志

铜虫 (小有名气)
全蓝的原因：ta克隆失败，发生了自连，形成完整的lacz片段，从而分解x-gal形成蓝色；部分白斑再次涂板变蓝原因：第一次涂x-gal的时候不均匀，建议在培养基50-60摄氏度的时候直接加入x-gal（多点没事），锥形瓶不离台面，摇匀。再倒平板。然后再继续后面的工作。

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付出定有回报
25楼2017-04-20 15:53:44
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